郁金香鳞片愈伤组织诱导研究

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摘要：以郁金香品种“粉色印记”的鳞片为外植体,研究鳞片部位以及不同激素组合对愈伤组织诱导的影响。结果表明：诱导愈伤组织的最佳培养基是MS+NAA2.0mg/L+6-BA1.5mg/L，诱导率为45%，鳞片上段是诱导愈伤组织的最佳鳞片部位，诱导率为65%。

关键词：郁金香；鳞片；激素；愈伤组织

中图分类号：S682.263文献标识码：A文章编号：1674-0432（2012）-02-0059-1

郁金香(Tulipa gesneriana )位居我国进口花卉之首，其生产依赖大量进口的原因主要是传统的栽培方式繁殖系数低，品种退化严重[1,2]。组织培养技术是解决这些问题的有效途径。笔者首次研究郁金香品种“粉色印记”愈伤组织诱导的鳞片部位和最佳激素组合，为规模化生产提供理论基础和技术支持。

1 材料与方法

1.1 试验材料

郁金香品种“粉色印记”。

1.2 试验方法

将郁金香鳞片和茎段分离，挑选无病斑的材料。用自来水将鳞片洗净，然后在超净工作台中用70%酒精消毒1min,再用0.1%的升汞消毒8-10min，取出后用无菌水冲洗3-5次，鳞片横切成上、中、下3部分，大小约0.8cm×0.8cm的方块，以MS为愈伤组织诱导的基本培养基，分别附加不同浓度的6-BA和NAA，共设16个处理（具体处理见表1），其中蔗糖含量为3%，琼脂条含量为0.7%，pH调至5.8。培养温度为（24±2℃），每天光照12h，光照强度为2000lx[3,4,5]。

2 结果与分析

2.1 不同激素组合对郁金香鳞片愈伤组织诱导的影响

将郁金香上段鳞片接种在编号为1-16的不同激素组合的培养基中进行培养，约8d后，在大多数鳞片切口处或鳞片边缘产生少量淡黄绿色的愈伤组织，随着培养天数的增加，愈伤组织的发生由鳞片边缘扩展到鳞片表面，出现白色突起。愈伤组织逐渐增加，培养20d后，统计郁金香愈伤组织的诱导情况，结果见表2。

由表2可以看出，这16种培养基诱导产生愈伤组织的情况各不相同，在诱导频率上差异明显，其中15号培养基对鳞片愈伤组织诱导率最高，达到45%，且愈伤组织疏密适中，颜色呈乳白色。因此，在NAA与6-BA配比的16中培养基中以15号培养基为最佳培养基。

2.2 不同鳞片部位对郁金香愈伤组织诱导的影响

将郁金香鳞片切成上、中、下3段，大小为0.82cm×0.8cm，分别接种于MS+NAA2.0mg/L+6-BA1.5mg/L培养基中进行培养，10d后鳞片开始变绿，随着培养天数的增加，鳞片不断发生变化，22d后鳞片凹面出现白色突起，形成愈伤组织。统计鳞片不同部位形成愈伤组织的情况，试验结果见表3。试验中观察到上段鳞片愈伤组织长势良好，颜色为白色，愈伤组织诱导率最高。中段和下段鳞片形成愈伤组织较少，诱导率较低。因此，上段鳞片为诱导愈伤组织的最佳部位，诱导率为65%。

3 讨论

在郁金香鳞片愈伤组织的诱导中，激素的种类和浓度具有重要作用，郁金香鳞片对不同激素组合反应不同。同时，不同鳞片部位产生愈伤组织的情况也不同。试验发现，郁金香“粉色印记”鳞片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+NAA2.0mg/L+6-BAmg/L，诱导率为45%，最佳鳞片部位为上段，诱导率为65%。本试验的成功完成，为郁金香的快繁提供了理论依据。

参考文献

[1] 杨永刚,代汉萍,胡新颖,等.郁金香器官离体培养再生小鳞茎的研究[J].园艺学报,2006,33(5):1133-1136.

[2] 陆文梁,王雪洁,郭仲琛.金香组织培养及器官分化的研究[J].园艺学报,1986,13(1):55-60.

[3] 李莺,杜瑞春,唐建云,等.不同植物生长调节剂对益母草愈伤组织诱导的影响.西安文理学院学报,2009,12(1):43-47.

[4] 曹昆,李霞.不同激素种类和配比对秤锤树愈伤组织诱导的影响研究[J].安徽农业科技,2001,36(118):10-12.

[5] 闻丽,张日清,李典军.不同激素配比对油茶花药愈伤组织形成的影响.经济林研究,2005,23(4):21-23.

作者简介：张莉恒（1990-），女，本科，吉林农业科技学院生物工程学院学生。

通讯作者：王霞，吉林农业科技学院生物工程学院讲师。