高效液相法测定复方樟脑乳膏中葡萄糖酸氯己定含量

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[摘要] 目的：采用高效液相法测定复方樟脑乳膏中葡萄糖酸氯己定的含量。方法：以Kromasil -C18（250.0 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，流动相为甲醇-水-三乙胺（44∶56∶1）（用磷酸调节pH值至3.5±0.1），流速为1.0 ml/min，检测波长258 nm。结果：线性范围为0.08～0.72 μg，r=0.999 9，平均回收率为99.92%，RSD=0.04%。结论：该方法便捷、灵敏、准确、重复性好，可以控制该药的质量。

[关键词] 高效液相法；复方樟脑乳膏；含量

[中图分类号] R927[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）10（a）-029-02

Determination of Chlorhexidine gluconate in Compound camphor tincture by HPLC

HUI Shu-jun

( Chifeng Institute for Drug Control, Chifeng024000,China)

[Abstract] Objective：A HPLC method for the determination of Chlorhexidine Gluconate in Compound camphor tincture.Methods：Kromasil -C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）column was used with methanol-water-triethylamine(44∶56∶1)（abjusted pH to 3.5±0.1 by phosphoric acid） as the mobile phase. The flow rate was 1.0 ml/min.The content was detected at wavelen of 258 nm. Results：The calibration curve was linear in the range of 0.08～0.72 μg, r=0.999 9. The average recovery rate was 99.92% and RSD was 0.04%. Conclusion：The method is accurate and reliable,suitable for the determination of compound camphor tincture.

[Key words] HPLC；Compound camphor tincture；Determination

我们采用高效液相法测定复方樟脑乳膏中葡萄糖酸氯己定的含量，结果表明该方法便捷、灵敏、准确、重复性好，可以控制该药的质量，现报道如下：

1仪器与试药

1.1仪器

LC-10ATVP型泵，SPD-10AVP型检测器，SLASS-VP色谱工作站。岛津UV-2450型紫外-可见分光光度仪。HR-200型万分之一天平。

1.2试剂与试药

醋酸氯己定对照品（C22H30Cl2N10・2C2H4O2）[（批号：100183~1999902）(供含量测定用)]由中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱醇，水为超纯水，其他试剂为分析纯。

1.3供试品

由内蒙古大唐药业有限公司提供。

1.4阴性对照供试品

由赤峰市药品检验所制备。方法：取按处方比例并以相同工艺制备的缺葡萄糖酸氯己定的阴性对照供试品。

2方法与结果

2.1色谱分析条件

2.1.1色谱柱色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，本实验研究采用Kromasil C18（250 mm×4.6 mm，5μm）色谱柱。

2.1.2流动相的选择以甲醇-水-三乙胺（44∶56∶1）（用磷酸调节pH值至3.5±0.1）为流动相，流速为1.0 ml/min，进行流动相条件摸索，结果醋酸氯己定保留时间为20 min、分离度大于1.5，峰形对称性较好。符合《中国药典》2005年版二部附录ⅤD的要求。理论板数大于3 000。

2.1.3检测波长的选择于紫外可见分光光度仪上，200～700 nm做光谱扫描。醋酸氯己定、葡萄糖酸氯己定在258 nm波长处有最大吸收。

2.2含量测定

参照葡萄糖酸氯己定软膏质量标准[1]，取本品约1 g（约相当于葡萄糖酸氯己定2 mg），精密称定，置125 ml分液漏斗中，加0.1 mol/L盐酸溶液30 ml，强力振摇，使均匀分散，加氯仿30 ml，振摇提取，静置分层，弃去氯仿液，再加氯仿30 ml，振摇提取，静置待分层完全，弃去氯仿液，水层溶液转移至50 ml量瓶中，分液漏斗用乙醇适量洗涤2～3次，合并于量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，精密量取续滤液5 ml置10 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，取续滤液，即得。另取醋酸氯己定对照品适量，加流动相制成每毫升含14 μg(约相当于葡萄糖酸氯己定20 μg)的溶液，按1 g醋酸氯己定相当于1.435 g葡萄糖酸氯己定计算。

2.3专属性考察

阴性对照试验：按“2.2”项下的方法制备供试品溶液和对照品溶液。另取按处方比例并以相同工艺制备的缺葡萄糖酸氯己定的阴性对照供试品。在上述色谱条件下，分别精密吸取对照品溶液、阴性对照供试品溶液、供试品溶液各20 μl，分别注入液相色谱仪，测得结果为：阴性对照供试品色谱图中在与葡萄糖酸氯己定对照品以及供试品色谱相应的保留时间处无色谱峰出现，表明其他成分对葡萄糖酸氯己定的测定无干扰。

2.4稳定性试验

取同一份供试品溶液，分别在0、2、4、8、12、24 h进行测定，记录色谱图。RSD=0.16％。葡萄糖酸氯己定在24 h内的峰面积积分值基本稳定不变。

2.5线性关系考察

取葡萄糖酸氯己定10.04 mg，精密称定，置100 ml量瓶中，加流动相使溶解，并稀释至刻度，摇匀分别精密吸取1.0、3.0、5.0、7.0、9.0 ml溶液置25 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，各取20 μl进样，按上述色谱条件测定，回归方程为：Y=2 154 408X+8 312，相关系数：r=0.999 9。结果表明，葡萄糖酸氯己定进样量在0.08～0.72 μg范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系。

2.6回收率试验

取葡萄糖酸氯己定，精密称定24.98 mg，置50 ml量瓶中，加流动相使溶解，并稀释至刻度，摇匀。再精密吸取上溶液2 ml置50 ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。

精密称取葡萄糖酸氯己定20.11、25.64、30.48 mg分别置25 ml量瓶中，用0.1 mol/L盐酸溶解并稀释至刻度。再量取以上溶液各3份2 ml，分别置125 ml分液漏斗中中，按100%的处方比例加入空白辅料，按“2.2”项下的方法，依法操作，测定每份供试品的含量，计算回收率，结果见表1。

结论：葡萄糖酸氯己定回收率为99.92%，RSD=0.04%，本法回收率较好。

2.7重复性试验

取同一批号供试品（批号：20060301）5份，各约1 g，精密称定，分别按“2.2”项下方法操作，测定每份供试品含量，RSD=0.46%。

2.8样品含量测定

取三批样品按“2.2”项下的方法处理并测定。三批供试品的含量测定结果见表2。

从表2数据可见，三批复方樟脑乳膏中葡萄糖酸氯己定的含量为100%左右。

3讨论

该法通过提取去除了膏剂的基质和其他成分，灵敏度高，精密度和回收率好，完全能够满足该品种质量标准的要求，为控制质量提供了可靠的定量方法依据。

[参考文献]

[1]国家药典委员会.国家药品标准（化学药品地方标准上升国家标准）[S].第2册.2002.10.

（收稿日期：2008-06-04）

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