倍氯米松尿素乳膏中丙酸倍氯米松的含量测定

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[摘要] 目的 建立高效液相色谱法测定倍氯米松尿素乳膏中丙酸倍氯米松含量的方法。 方法 色谱柱（菲罗门C18 4.6 mm×150 mm，4 μm），以甲醇-水（82∶18）为流动相，流速1.0 mL/min，检测波长240 nm。 结果 线性范围（0.94～4.72）μg/mL（r = 0.999 99），高、中、低浓度的平均回收率分别为101.46%、101.35%、101.57%，RSD分别为0.29%、0.17%、0.77%。 结论 该法分离度好、快速、简便、重现性好，可用于倍氯米松尿素乳膏的质量控制。

[关键词] 倍氯米松尿素乳膏；高效液相色谱法；丙酸倍氯米松；含量测定

[中图分类号] R927.2[文献标识码] B[文章编号] 1673-9701（2012）12-0064-02

倍氯米松尿素乳膏是衢州市皮肤病性病医院的医院制剂，适用于过敏性与炎症性皮肤病和相关疾病，如湿疹、过敏性皮炎、接触性皮炎、神经性皮炎、扁平苔藓、盘状红斑狼疮、掌跖脓疱病、瘙痒、银屑病等。为了更有效地控制产品质量，参考相关文献[1-5]建立了测定产品中倍氯米松含量的高效液相色谱法。

1 仪器与试药

1.1 仪器

高效液相色谱仪：岛津LC-10AD泵，SPD-10A紫外检测器，色谱柱（菲罗门C18 4.6 mm×150 mm，4 μm），N2000色谱工作站；电子天平：MettlerAE240；超声波清洗器；紫外分光光度计：岛津UV2450。

1.2 试药

丙酸倍氯米松对照品（中国药品生物制品检定所提供）；甲醇为色谱纯，水为去离子水；空白基质，倍氯米松尿素乳膏3批由衢州市皮肤病性病医院提供，规格为25 g，每克中含丙酸倍氯米松0.25 mg。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适应性试验

色谱柱（菲罗门C18 4.6 mm×150 mm，4 μm），以甲醇-水（82∶18）为流动相，流速为1.0 mL/min，240 nm检测波长，20 μL进样量，柱温为室温，用外标法定量峰面积。在此色谱条件下，出峰时间为4.9 min，理论塔板数均在2 000以上，阴性对照品无干扰，分离度达到要求。

2.2 线性关系

将105℃干燥至恒重的丙酸倍氯米松对照品约0.011 80 g精密称取后置100 mL量瓶中，加入甲醇-水使其溶解，稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液5 mL，置100 mL量瓶中加甲醇-水至刻度，即得对照品储备液[2-4]，精密量取此储备液2、3、4、5、6、8、10 mL分别于50 mL量瓶中，加入甲醇-水稀释至刻度，摇匀，依据上述色谱条件进样20 μL，记录峰面积，以峰面积A为纵坐标，浓度C为横坐标进行线性回归，得回归方程为Y=647X+4.2×104（r = 0.999 99，n = 7），线性范围为（0.94～4.72）μg/mL。

2.3 精密度试验

取丙酸倍氯米松样品，重复进样5次，按2.7项下样品含量测定方法测定日内精密度，结果RSD为0.88%（n = 5）。

2.4 重复性试验

取同一批号样品5份，按2.7项下含量测定方法进行样品测定，结果丙酸倍氯米松含量平均值为103.85%，RSD=0.54%（n = 5）。

2.5 稳定性试验

分别对2.3项下丙酸倍氯米松样品进样20 μL，在0、2、4、6、…… 24 h按照2.7项下含量测定的条件进行峰面积测定，计算含量，结果RSD=0.60%，说明样品在24 h内稳定。

2.6 回收率试验

取空白基质9份各0.5 g，精密称取分别置50 mL容量瓶中，再精密称取丙酸倍氯米松对照品0.011 80 g，置25 mL量瓶中，用流动相溶解后，继续用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取上述溶液5 mL置100 mL量瓶中，加流动相至刻度并摇匀，精密量取6、5、4 mL各3份分别加入上述9份容量瓶中，按2.7项下含量测定方法处理。

2.7 样品含量测定

分别取样品三批约0.5 g，精密称取，混匀后置50 mL量瓶中，加流动相30 mL于80℃水浴中加热溶解后置超声波清洗器中超声15 min，放置室温，用流动相稀释至刻度，摇匀，置冰浴中冷却2 h，马上滤过，取续滤液，作为样品溶液。另精密称取丙酸倍氯米松对照品0.014 62 g置于50 mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，再取2 mL，精密量取置200 mL容量瓶中加流动相至刻度，摇匀，作为对照品溶液。分别取上述三批样品溶液和对照品溶液20 μL进样，按外标法计算百分标示量，结果见表2。

3 讨论

3.1 溶液配备

3.1.1 水浴热溶丙酸倍氯米松软膏黏性大，样品的溶解与滤过受到影响。直接溶解、过滤时，样品损失较大。经试验，通过水浴加热加快样品的溶解，同时，溶解后的样品溶液经冷却处理后则滤过完全。结果表明，此方法操作简便，准确性高，稳定性好，重复性好，可作为丙酸倍氯米松软膏含量测定的方法。采用本法测定80℃水浴加热提取时要防止流动相喷出。

3.1.2 流动相超声丙酸倍氯米松在本品中含量很少，有效的提取方法是含量测定准确的重要前提；根据丙酸倍氯米松在流动相中的良好溶解性，我们采用流动相超声使之溶解，从而达到提取完全的目的；加样回收试验结果表明，本方法能有效准确地测量倍氯米松尿素乳膏中丙酸倍氯米松。

3.2 测定波长

色谱扫描结果显示在波长为240 nm处丙酸倍氯米松在流动相中有最大吸收，因此选择测定波长为240 nm。

3.3 流动相

本实验曾经用甲醇、无水乙醇作为溶剂进行提取，结果提取后测得的含量差别无几，说明选用这两种溶剂均可。在流动相的选择中，曾采用甲醇-水（74∶26），但倍氯米松尿素乳膏这一复方制剂的成份复杂，丙酸倍氯米松以外的成分同样对测定有影响，经过优化和摸索，结果以甲醇-水（82∶18）的分离效果较好，回收率高。最后选择甲醇-水（82∶18）为本实验的流动相。

3.4 优点

本实验采用HPLC法测定倍氯米松尿素乳膏的含量，处理简便，测定结果准确可靠，可用于该制剂的质量控制[6]。

[参考文献]

[1]国家药典委员会. 中华人民共和国药典（二部）[S]． 北京：化学工业出版社，2O05：79-80.

[2]饶艳辉，胡虹，周学琴. 高效液相色谱法测定血液中丙酸倍氯米松的含量[J]. 中国现代医药杂志，2008，10（2）：41-42.

[3]陈振霆. HPLC测定无极膏中丙酸倍氯米松的含量[J]. 海峡药学，2005，17（3）：64-65．

[4]谭生建，胡文祥. HPLC法测定箭红气雾剂中丙酸倍氯米松含量测定方法研究[J]. 现代科学仪器，2000，6：60-61.

[5]丘桂贤，宋新康. HPLC法测定丙酸倍氯米松软膏中丙酸倍氯米松的含量[J]. 药学学报，2009，25（6）：545-546.

[6]堵伟锋，李磊，马洪怡. 高效液相色谱内标法测定无极膏中丙酸倍氯米松的含量[J]. 安徽医药，2009，13（2）：162-163.

（收稿日期：2011-10-19）