饮用纯净水微生物检验中菌落总数的不确定度评定

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【摘要】目的通过不确定度评定对饮用纯净水中菌落总数测量结果临界值进行判断。方法根据GB4789.2——2010《食品微生物学检验菌落总数测定》方法进行不确定度分析评定。结果饮用纯净水中菌落总数测量扩展不确定度为0.144，当检验结果以2次测量对数值的平均值表示时，其取值区间分布于logX±0.144之间。结论样品平行测试结果取对数用于菌落总数不确定度的评定，可以用来对检测结果处于超标临界值的合理判定。

【关键词】纯净水；菌落总数；不确定度；评定

测量不确定度能够合理赋予被测量结果的分散性，但微生物检验中不确定度的评定工作目前应用很少。我们在检测饮用纯净水的菌落总数指标时，采用双人平行测定，严格按国标方法进行一段时间的测试，测试结果取对数用于菌落总数不确定度评定。通过对测量结果可疑程度的定量表述，找出检验过程中的关键控制点，降低实验误差，尤其应用在检测结果处于超标临界值时的合理判定。

1实验部分

1.1试验方法《瓶（桶）装饮用纯净水卫生标准》GB17324——2003规定微生物指标菌落总数≤20CFU/mL，微生物指标按GB/T4789.21—— 2003《食品卫生微生物学检验 冷冻饮品、饮料检验》和GB4789.2——2010《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》规定的方法检验。

1.2试验步骤以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL生理盐水的无菌锥形瓶中，充分混匀，制成1：10的样品匀液。选择原液及1：10样品匀液各1mL于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时作空白对照。及时将15mL-20mL平板计数琼脂培养基倾注平皿，均匀，置于36℃±1℃恒温培养48h±2h，进行菌落计数。

1.3建立数学模型设菌落总数为A，检测结果为X，则：A=XCFU/mL。

2不确定度的评定

水中菌落总数检验不确定度的主要分量来源于重复测量，可以采用A类不确定度的统计方法来评定测量不确定度，B类不确定度分量对合成不确定度贡献较小可忽略不计。采用上述方法检测水样菌落总数样品12份，检测结果见表1。

采用贝塞尔公式计算合并样品标准差：SP =1P（n-1）S2i =0.10483812×（2-1）=0.0935检测结果不确定度是：Uc=SP2=0.066，扩展不确定度是：U=TUc，取置信水平P=95%，V=12，查T分布表得：T=2.18，计算出扩展不确定度为U=2.18×0.066=0.144，当检验结果以2次测量对数值的平均值表示时，其取值区间分布于logX±0.144之间。

3讨论

APLAC认为平板测试的结果在大于10CFU/mL的情况下，不是正态分布属于偏态分布，这些数据首先要转换成对数，使分布接近正态分布。针对测量不确定度评定，微生物检测属于非严格性、非度量学和非统计学一类，因此单独采用重复性和再现性数据来评定不确定度是合适的方法。正确评定不确定度可以保证检测结果的科学性和公正性，尤其应用在检测结果处于超标临界值时的合理判定，实验室检测报告应同时给出测量不确定度。

参考文献

[1]张霞.微生物检验中不确定度评定[J].中国卫生检验杂志，2003，13（4）：141-142.

[2]张拉第.不确定度在微生物菌落总数测定中的应用[J].中国卫生检验杂志，2006，16（3）：268-269.