首页 > 范文大全 > 正文

广东紫珠"药学成分的提取与结构鉴定

开篇:润墨网以专业的文秘视角,为您筛选了一篇广东紫珠"药学成分的提取与结构鉴定范文,如需获取更多写作素材,在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享!

(信阳职业技术学院附属医院河南信阳464000)【摘要】目的 对广东紫珠的化学成分提取并进行了结构鉴定。 方法 利用化学方法及波谱分析技术,进行提取、分离和鉴定。 结果和结论 提取分离出了5个化合物,经鉴定化合物分别为木犀草素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、正己醛、肉桂酸苄酯、苯丙烯酸、白桦脂酸。 【关键词】广东紫珠,抗炎,提取,分离,结构鉴定【中图分类号】R 473【文献标识码】A【文章编号】1004-5511(2012)04-0664-01 广东紫珠(Callicarpakwangtungebsis Chun.)为马鞭草科紫珠属植物的干燥全草,广东紫珠别名万年青,老鸦饭,金刀菜等,常生于山坡林或灌木丛中,广泛分布于湖北、江西、湖南、浙江等省,资源丰富。广东紫珠具有止血、止痛之功效,主治偏头风痛、吐血、跌打肿痛、外伤出血等,在民间主要用于止血疗伤,外伤出血等,其化学成分研究国内外鲜见报道。1.仪器、试剂与材料1.1 仪器:核磁共振仪DPX-400(TMS为内标),上海医药工业研究院分析测试中心,R-201型旋转蒸发器(上海申胜生物技术有限公司生产),SHZ-D(Ⅲ)型循环水式真空泵(巩义市英峪予华仪器厂生产),KQ-250DE超声波提取器(江苏昆山超声仪器有限公司),UV365、254紫外显色仪,CombiFlashRRf中低压柱层析(环球(香港)科技有限公司)。1.2 试剂与材料:所用试剂均为分析纯及化学纯,研究所用药材为生长在江西省的广东紫珠全草。2.方法2.1提取:将风干的广东紫珠8kg粉碎,采用70%乙醇冷浸提取,减压浓缩至干浸膏,10%乙醇超声溶解,取上清液上AB-8大孔树脂,80%乙醇洗脱物432g。将洗脱物浓缩至无醇味,混旋在少量水中,分别用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取,分别得石油醚浸膏约19g,乙酸乙酯浸膏87g,正丁醇浸膏147g,水部位198g。2.2 分离:取乙酸乙酯萃取物浸膏30g进行硅胶柱色谱(Ф6cm*L21cm)分离。填充硅胶(200-300目),样品以石油醚、乙酸乙酯、甲醇按极性递增进行硅胶柱层析, TLC检测合并,并按体积收集馏分,50ml收集一份。其中石油醚:乙酸乙酯(20:1)洗脱得晶体肉桂酸苄酯(9mg),白桦脂酸(11mg);石油醚:乙酸乙酯(10:1)洗脱部位经过硅胶柱层析得单体正己醛(17mg);乙酸乙酯:甲醇(10:1)洗脱部位通过聚酰胺柱层析和中低压柱层析及RP-18柱层析得单体木犀草素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(22mg),苯丙烯酸(14mg)。3.广东紫珠活性成分的结构鉴定采用AB-8大孔树脂、Sephadex LH-20、RP18、硅胶和中低压等柱色谱方法,共分离鉴定出5个化合物。经1HNMR、13CNMR、1H-1H COSY、HSQC、HMBC等波谱与化学方法鉴定,分别确定了它们的结构。3.1 化合物1的结构鉴定:浅黄色无定型粉末,易溶于甲醇。酸水解检识到葡萄糖的存在。HCL-Mg反应溶液变粉红色,mp250-253℃,Rf 0.20 ( 氯仿-甲醇-醋酸,5:1:0.01);1HNMR:δ12.08(1H,S,5-OH),δ8.59(1H,S,4'-OH);δ7.46(1H,d,J=8.4Hz,6′-H),δ7.44(1H,brs,2′-H);δ6.92(1H,d,J=8.4Hz,5′-H);δ6,80(1H, brs,8-H);δ6.78(1H,S,3-H);δ6.46(1H,brs,6-H);δ5.10(1H,d,J=7.4Hz,1″-H);13CNMR(150MHz,DMSO-d6)数据见下表,该化合物的1HNMR[4]13CNMR[5]数据与木犀草素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的数据基本一致。3.2化合物2的结构鉴定:浅黄色粘稠状液体,易溶于甲醇、丙酮中,FeCl3-K3[Fe(CN6)]试剂反应呈阴性,为非酚性成分。1H-NMR谱显示分子至少含有十个氢质子,看放大后的图谱,知溶剂峰掩盖了一部分氢的信号,δ9.75(1H,t,J=2,4Hz )知该氢为一活泼氢质子信号。δ2.4(2H,m),δ1.63(2H, d, J=7,15Hz) ,δ0.87(4H,t, J=7,14Hz)。13CNMR谱中提示分子中含有六个碳,其中δ202.6应该为一醛基碳信号,DEPT135显示分子中含有一个羰基、四个CH2、一个CH3,推测分子中含有一醛基,同时结合1H-NMR谱中各氢的偶合关系,并查对相关文献资料确定化合物为正己醛。3.3化合物3的结构鉴定:白色无定型粉末,溶于甲醇及丙酮中,分子极易氧化变质。1HNMR谱显示:芳香区有10个氢质子,借此可以推测分子中可能含有两个苯环,δ6.59(1H,d, J=16Hz),δ7.82(1H,d,J=16Hz)这两个氢信号提示分子中含有一反式双键,且连在能共轭的基团上,得知分子中含有苯丙酰基,另外δ7.94(2H,d, J=8Hz),δ7.65(1H,t,J=7.8Hz),δ7.57(2H,q),δ7.50(2H,t,J=8.8Hz),δ7.35(2H,d,J=3.3HZ)。13CNMR谱显示分子中含有13个碳信号,但13CNMR谱δ128.5左右的三个碳明显比别的碳信号峰高,推测可能为叠碳。DEPT135中给出如下信息:分子含有一个CH2,没有CH3,一个羰基碳、10个CH信号。推测分子中含有一苄基,且苄基中CH2携氧。综合以上分析并查阅相关文献,确定化合物3为苯丙烯酸苄酯,又名肉桂酸苄酯。3. 4化合物4的结构鉴定:化合物4为白色无定型粉末,易溶于水、甲醇中,1H-NMR谱显示化合物含有六组氢,且全为芳香区的信号,其中δ6.50(1H,d ,J=16Hz), δ7.80 (1H,d, J=16HZ),二者构成连有吸电子基且能发生共扼的反式双键,除此之外还含有五个芳香氢质子,推测可能含有一单取代苯环,综合以上分析推测为苯丙烯酸,参考有关文献对比数据基本一致,故化合物4为苯丙烯酸。3. 5化合物5的结构鉴定:白色无定形粉末,易溶于丙酮,Rf0.47(环己烷:乙酸乙酯=4:1)Liberman-Burchard反应阳性。采用上述类似化学检测并结合光谱数据分析,及与文献对照,故鉴定为白桦脂酸。在接下来的实验中,将会通过二维图谱、质谱、高效液相色谱等对所分离到的五种单体化合物进行进一步的鉴定。广东紫珠中其他单体化合物的提取分离工作还在进行中,由于极性小的部位和极性大的部位容易出现新的单体化合物,因此将会对石油醚萃取部位和水部位进行重点分离。参考文献[1]江苏植物研究所等编著.新华本草纲要[M].上海:上海科技出版社,1988.400~404[2]国家医药管理局中华本草编委会.中华本草[M].第六卷.上海:上海科学出版社,1999.553[3]徐国钧,何宏贤,徐潞珊,等.中国药材学(上)[M].北京:中国医药科学出版社,1996.915[4]周宏雷,袁欠菜.中华苦买菜化学成分的研究[J]. 中草药,199627(5):267-268