结核分枝杆菌在两种不同培养基中的阳性检出率比较

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【摘 要】 目的：比较结核分枝杆菌在改良罗氏培养基与丙酮酸钠培养基中的阳性检出率，为提高实验室结核分枝杆菌阳性培养率提供科学依据。方法：首先按常规方法对715份送检标本进行前处理，然后同时接种于两种培养基中，前两周每2天观察1次，之后每周观察2次，并记录阳性出现的时间，8周没有出现结核分枝杆菌菌落者记录为阴性。结果：丙酮酸钠培养基比改良罗氏培养基能平均提前6.87天得到阳性结果，而且能明显提高复治病例的阳性培养率。

【关键词】 结核分枝杆菌 改良罗氏培养基 丙酮酸钠培养基

结核病是感染结核分枝杆菌引起的慢性疾病，是严重危及全球的公共卫生问题之一。结核分枝杆菌的快速检出在结核病的诊断中起着重要作用[1]。而结核分枝杆菌在普通的培养基上生长缓慢，因此培养基的选择直接影响着疾病诊断的快慢。为了及时诊断结核病，按照有关文献报道的方法[2]，本研究将715份临床送检标本分别接种于改良罗氏培养基与丙酮酸钠培养基中，比较分析两种培养基的培养阳性率及分离速度，旨在为提高实验室分枝杆菌阳性培养率提供科学依据。

1 材料和方法

1.1 材料来源及分类

实验材料来自我院附属医院呼吸内科，共715例，其中临床确诊为结核病的620例，初治患者419例，复治患者201例。

1.2 改良罗氏培养基的配制

按常规配制[3]。

1.3 丙酮酸钠培养基的配制

把改良罗氏培养基中的甘油改为丙酮酸钠（7g）。

1.4 实验方法

首先按常规方法对715份送检标本进行前处理，然后同时接种于改良罗氏培养基与丙酮酸钠培养基中，前两周每2天观察1次，之后每周观察2次，同时记录阳性出现的时间，8周没有出现分枝杆菌菌落者记录为阴性。

1.5 统计方法

采用SPSS17.0统计软件进行统计和分析。

2 结果

2.1 培养阳性率比较

从715份标本中改良罗氏培养基分离出165例分枝杆菌，阳性分离率为23.07%；丙酮酸钠培养基分离出174例，阳性分离率为24.34%。两种固体培养基总阳性率比较P>0.05，比较差异无统计学意义。

2.2 培养阳性所需时间比较

改良罗氏培养基分离出165例分枝杆菌平均需要31.29天；丙酮酸钠培养基分离出的174例分枝杆菌平均需24.42天，比较两者差异有统计学意义（P

2.3 初治、复治病例的结核分枝杆菌培养阳性率比较

改良罗氏培养基从临床确诊为结核病的620例患者中分离出结核分枝杆菌165例，阳性分离率为26.61%，其中初治组的阳性分离率是30.07%（126/419），复治组的阳性分离率为19.40%（39/201）；丙酮酸钠培养基从临床确诊病例中分离出174例，阳性率为28.06%，其中初治组的阳性分离率是30.07%（126/419），复治组的阳性分离率为23.88%（48/201）。两种培养基对初治组的阳性分离率相同，但对复治组的阳性分离率进行比较，有明显的统计学差异（P

3 讨论

1958年Stonebrink曾提出在改良罗氏基中加入丙酮酸能明显促进耐异烟肼的人型结核分枝杆菌生长。之后，国内有关文献[4]报道证实在改良罗氏培养基中加入丙酮酸钠或用丙酮酸钠替代原培养基中的甘油后对结核分枝杆菌的培养均优于改良罗氏培养基，但报道仅仅局限于丙酮酸钠能促进结核分枝杆菌的生长，并没有涉及丙酮酸钠培养基是否能提高临床送检标本的结核分枝杆菌阳性培养率。

本研究用两种固体培养基同时对715份标本进行培养后，分析比较两种不同的固体培养基对结核分枝杆菌的阳性检出率，结果显示两种固体培养基对结核分枝杆菌总的阳性分离率仅有1.27%的区别，差异不明显（P>0.05），没有统计学意义。但在对复治组标本进行分离培养时发现，两种不同的固体培养基对结核分枝杆菌的阳性培养分离率则呈现4.48%的差异，有明显的统计学意义（P

分析出现以上结果的原因是因为复治组的菌株经化疗后，结核分枝杆菌的活力明显减弱，其生存能力及繁殖能力显著降低，致使培养阳性检出率也随之显著下降。但丙酮酸钠的分子结构相对较为简单，是一个更容易被优先利用的碳源，这样使得经化疗后活力降低的菌株能充分利用其中的碳元素而得以快速生长繁殖，因此有4.48%的菌株在改良罗氏培养基上不能生长，但是在丙酮酸钠培养基中能够生长。从出现阳性结果所需时间上比较，本研究结果显示丙酮酸钠培养基比改良罗氏培养基平均缩短6.87天，同有关文献[2]报道的相同，均反映出丙酮酸钠对结核分枝杆菌的生长有明显促进作用。

综上所述，两种不同的培养基在总的结核分枝杆菌培养阳性分离率上没有显著差异，无统计学意义，但是在出现培养阳性的时间上，丙酮酸钠培养基比改良罗氏培养基明显缩短，而且丙酮酸钠培养基能显著提高对复治组的培养阳性检出率。因而在实验室做结核分枝杆菌培养时可采用丙酮酸钠培养基，以提高结核分枝杆菌的阳性分离率并缩短诊断所需时间。

参考文献：

[1]申建维，袁玮，李娉等.平菇双相培养基用于结核杆菌培养的研究[J].中国防痨杂志，2001，23（5）：241.

[2]蔡杏珊，吴龙章，吴妙玲等.两种固体培养基对分枝杆菌培养影响的比较[J].中华检验医学杂志，2003，26（5）：314.

[3]李影林.中华医学检验全书[M].北京：人民卫生出版社，1996：1119-1128.

[4]吴龙章，蔡杏珊，黄洁玲等.应用噬菌体裂解法测定吡嗪酰胺药物敏感性试验的方法学研究[J].中国防痨杂志，2008，30（3）：191-193.