微波辅助提取马齿苋总黄酮工艺研究

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摘 要：通过单因素试验研究乙醇浓度、料液比、提取温度、提取时间4个因素对马齿苋中总黄酮提取量的影响。在单因素的基础上，采用正交试验法优化提取工艺。结果表明微波辅助提取马齿苋总黄酮最佳提取条件为：70%乙醇，料液比1g：20mL，70℃，提取20min，在此条件下，马齿苋总黄酮得率为6.36mg/g。

关键词：马齿苋；总黄酮；微波辅助提取；正交试验

中图分类号：R284 文献标识码：A

马齿苋，马齿苋科1a生肉质草本植物，又名蚂蚁菜，五行草等，具有抗心血管疾病和抗氧化的功效。本研究应用微波辅助提取马齿苋中黄酮类物质，利用正交试验法优化提取条件，为其工厂化开发和利用提供理论基础。

1 材料与仪器

野生马齿苋（2013年7月份采自牡丹江市郊）；芦丁对照品（中国食品药品检定研究所）；乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠均为分析纯；试验用水为蒸馏水。紫外分光光度计；分析天平；数显鼓风干燥箱；高速万能粉碎机；温压双控微波萃取仪。

2 方法

2.1 标准曲线的绘制

精确配制芦丁对照品标准溶液，全波长扫描，在510nm处有最大光吸收。依据吸光值计算回归方程为：Y=0.0264A-0.040（Y为芦丁浓度，A为吸光值），R2=0.9996。

2.2 样品含量的测定

将新鲜马齿苋全草洗净，晾干，80℃干燥至恒重，粉碎过60目筛。称取马齿苋干粉1g，置于烧瓶中，加入一定浓度的乙醇，微波萃取若干分钟，冷却补重，过滤，洗涤，滤液用乙醇定容，得总黄酮提取液。分光光度计测定吸光值并计算总黄酮的含量。

2.3 单因素试验

研究乙醇浓度、料液比、提取温度及提取时间4个因素对马齿苋总黄酮提取量的影响，确定各因素的最佳范围，每个因素重复试验3次，取其平均值。

2.4 正交试验

根据单因素试验结果，选取乙醇浓度、料液比、提取温度及提取时间4个因素的较优水平，按L9（34）设计进行正交试验。

3 结果与分析

3.1 乙醇浓度

在料液比为1g：30mL，温度为60℃，提取时间为30min的条件下，考察乙醇浓度对总黄酮提取的影响。随着乙醇浓度的增加，提取量增大。当乙醇浓度在70%时，黄酮溶解度最大，提取量最高，超过70%后，浓度再增加，黄酮溶解度减少。同时，醇溶性杂质、色素等成分溶出量增加，最终导致提取量下降。

3.2 液料比

在乙醇浓度为70%，提取温度为60℃，提取时间为30min的条件下，考察液料比对总黄酮提取量的影响。随着料液比的增加，提取量增大，但当料液比大于1g：30mL时，提取量趋于稳定，说明此时的溶剂用量已能将黄酮类物质充分溶出。

3.3 提取温度

在料液比1g：30mL，乙醇浓度为70%，提取时间30min的条件下，考察温度对总黄酮提取量的影响。温度升高，扩散、溶解速度加快，有利于黄酮转移到溶剂中，提取量升高。但温度超过70℃后，提取液颜色变深，黄酮类物质被破坏，且杂质的溶出量也增多，提取量下降。

3.4 提取时间

在料液比1g：30mL，乙醇浓度为70%，温度为60℃的条件下，考察提取时间对总黄酮提取量的影响。可以看出，提取时间超过30min后，提取量变化不明显，时间延长，对于提取的意义不是很大。

3.5 正交试验

在单因素试验基础上，对影响马齿苋总黄酮的提取因素进行4因素3水平正交试验，采用L9（34）正交表，正交试验设计及结果见表1。

极差分析结果表明，影响总黄酮提取量的因素的主次顺序为：乙醇浓度>提取温度>提取时间>料液比，方差分析显示乙醇浓度对总黄酮提取的影响差异显著（P

4 结语

微波辅助萃取法具有高效性和强选择性等特点，而且操作简单、产率高，因此广泛应用于天然产物的提取中。本文以乙醇作为溶剂提取马齿苋总黄酮，研究了提取因素对提取量的影响，并在单因素试验基础上进行正交试验，得出乙醇70%，料液比1g：20mL，提取温度70℃，提取时间20min为微波辅助提取马齿苋总黄酮最佳工艺条件。

参考文献

[1] 王莉，刘志勇，等.微波技术辅助测定马齿苋中总黄酮和多糖的含量[J].食品工业技术，2002，23（05）.

[2] 孙希云，牛广财，等.马齿苋中黄酮类化合物的最佳提取工艺[J].食品与发酵工艺，2004，30（11）.

作者简介：纪丽丽（1980-），女，辽宁人，硕士，讲师，主要从事植物有效成分提取、分离及活性分析等方面的研究。