四种梅毒抗体血清学检验方法的比较

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【摘要】 目的 评价四种梅毒血清学检验方法的敏感度和特异性以及对梅毒诊断的临床应用和价值。方法 分别采用ELISA、TRUST及胶体金法3种不同的血清学方法对255例皮肤科门诊患者标本进行检测，结果均以梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)进行确认，比较ELISA、TRUST和胶体金法对梅毒的诊断价值。结果 在对87例阳性和168例阴性标本的检测中，TRUST法、胶体金法、ELISA诊断梅毒的敏感度分别为7356%、954%、988%，特异度分别为970%、988%、100%。TRUST法与TPPA法检测结果差异有统计学意义(P

【关键词】 梅毒抗体; TPPA、TPELLSA、TRUST;胶体金法

作者单位：457000 河南省濮阳市人民检验科 梅毒是一种由梅毒螺旋体(TP)引起的全身各器官病变的性传播疾病，其传染力强、危害性大。据世界卫生组织(WTO)报告，成年人每年新发梅毒1200万，已成为严重的公共卫生问题［1］。梅毒的诊断需依据病史，临床表现及血清学诊断，由于梅毒早期的临床表现并不典型，有些患者对病史陈述缺乏真实性，故血清学检测是诊断梅毒的主要手段之一。目前，临床实验室常用的血清学诊断TP的有甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)，胶体金法，ELISA法、TPPA法等等不同的检测方法都有其特殊的临床应用价值，选择有效的方法对梅毒早期诊断、预防和控制梅毒的传播，避免因错误的检测结果引起不必要的医疗纠纷有着重要意义。

本文对255例患者的血清就我院检验科常用的TRUST法胶体金法ELISA法以下方法学评价。

1 资料与方法

11 一般资料 选择2011年1月至12月皮肤科患者255例，年龄1970岁。男性125例，女性：89例。

12 试剂与仪器 TRUST试剂、胶体试剂均为英科新创公司产品，ELISA试剂为上海科华生物工程股份有限公司产品，TPPA试剂由日本富士株式会社产品：

全自动酶免分析系统(RMP200)振漏器、离心机等。

13 检测方法 所有受试者均空腹抽血5 ml，4000r/min离心5 min后分离血清，血清标本不能及时检测则置于4℃冰箱，避免反复冻融，均采用TRUST法，ELISA法，胶体金法与TPPA对所选择标本按各种方法试剂盒说明进行检测。前三种方法所检测结果均与TPRA进行比较。

14 统计学方法 每种方法与TPPA法检测结果之间采用χ2检验，均以P

2 结果

对255例皮肤科门诊患者用四种梅毒抗体血清学检测，以TPPA试验为金标准，对TRUST法，胶体金法,ELISA法进行评价，其结果表明，TRUST、胶体金、ELISA的敏感度分别7356%、954%、988%，特异度分别为970%、989%、100%，ELISA法，胶体金法与TPPA法比较差异无统计学意义(P>005)，而TRUST与TPPA法比较差异有统计学意义(P

表1 三种血清学方法检测结果的评价

方法 TPPA

+ 

总计敏感度(%)特异度(%)

TRUST +64 5 69 7356 970

23 163 183

胶体金 +83 2 85 954 988

5 166 171

ELISA +86 0 86 988 100

1 168 169

3 讨论

人感染梅毒螺旋体后，可存于患者的血液及脑脊液中，3~6周可产生非特异性抗类脂抗体和特异性抗螺旋体抗体IgM和IgG、IgG终身存在于人体内，可终身检出阳性［2］。临床梅毒检测常用血清学试验分为非梅毒螺旋体抗原试验(如TRUST、RPR)和梅毒螺旋体抗原试验(TPPA,ELISA等)。

TRUST是采用牛心中提取的心脂肪，同固醇、孵磷脂组成性病研究室VDRL抗原重地含有特制的甲苯胺红溶液制成，检测血浆或血清中的反应素，在梅毒感染初期，由于反应素不足，无法用TRUST检测到，一般为阴性。4周后阳性率10%～30%，6~8周后大多100%，经治愈由25%自然转阴［3］。很多时候易受到某些传染病或自身免疫性疾病的影响，常出现生物学假阳性，主要见于怀孕、SLE、类风湿性关节炎等。由于TRUST试验在梅毒诊断上出现较高的假阳性和假阴性结果，许多学者以为TRUST已不适合作为梅毒筛选试验，但是TRUST试验滴度与病程有关，由于非特异性性抗体是TP破坏患者组织，后释放的物质刺激机体产生的，TP在人体的活动程度基本上与此抗体的滴度成正比，所以TRUST是梅毒经诊断后，观察疗效和判断复发的指标［4］。

临床上常用的检测特异性抗的试验有胶体金，ELISA,TPPA试验，胶体金法是一种应用现代生物工程技术制备的高度纯化的单克隆TP的基因工程抗原，具有快速操作简便，准确的特点，而且不需要特殊设备，结果易判读，但其法也存在一定的假阳性。在TP潜伏期时易漏诊，所以只能作为急诊或术前的一般筛查。TPPA是将梅毒的精制菌体成分包被在人工载体明胶粒上，对梅毒特异性抗体检测具有高度特异性和敏感性，是目前公认的确认实验，但TPPA法操作复杂，结果判定需人工而不能用于自动化，限制了其用于大批量标本的筛查。ELISA法是用双抗原夹心法测血清中的特异性抗体，对各期梅毒的检出率较高，其特异性和敏感性与TPPA非常接近，并且具有操作简便，可自动化，标准化的优点，能大批量同时检测，但ELISA结果阳性只能说明正在或曾经感染过梅毒，而不能判断梅毒的活动情况，故不能用于疗效观察，梅毒复发或再感染的诊断。

综上所述，根据梅毒螺旋体的生物学及免疫学特性，结合临床上不同的检测目的，采用ELISA法对临床标本进行大批量标本的筛查，胶体金法用急诊或术前筛选，用TPPA法进行确诊，以TRUST法进行疗效判断是较理想的实验室梅毒血清学检验组合。

参 考 文 献

［1］ 薛大奇关于当前梅毒诊治中的几个问题的探讨中国性科学,2008,8(17)：2325.

［2］ 阮豪骥两种梅毒检验方法比较的初步研究.检验医学,2005,17(2):180.

［3］ 杨林杨健等早期梅毒治疗前位血清学分析临床皮肤科杂史,2002,27(5)：314315.

［4］ 吴薇试析TPHA与TRUST在梅毒血清学诊断中的应用.中国卫生检验杂志,2003,13(2)：235.