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新生儿110例凝血三项及纤维白单体聚合功能测定的研究

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【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2011)11-0239-01

【摘要】目的:研究新生儿凝血功能及血浆纤维蛋白单体聚合功能。方法:常规测定新生儿PT、APTT和FIB并利用纤维蛋白单体聚合功能自动监测系统测定新生儿血浆纤维蛋白单体聚合速率,反映新生儿凝血功能及血浆纤维蛋白单体聚合功能。结果:新生儿组各项检测指标分别为PT(16.50±4.39)s、APTT(59.90±19.1)s、FIB(1.59±0.60)g/L、FMPV(0.342±0.225),ODmax(0.056±0.032),比对照组PT(13.20±2.01)s、APTT(35.6±6.72)s、FIB(3.12±0.85)g/L、FMPV(0.514±0.116),ODmax(0.146±0.032)的结果均明显降低,两组比较均存在显著差异(P0.01)。而新生儿组FMPV/Odmax(5.841±2.426)较对照组FMPV/Odmax(3.579±0.256)升高,两组比较存在显著差异(P0.01)。结论:虽然新生儿组PT、APTT与对照组(成人)比较明显延长,FIB水平明显降低,但血浆纤维蛋白单体反应性升高,纤维蛋白原功能明显增强。

【关键词】凝血酶原时间,纤维蛋白原,分析, 新生儿。

新生儿凝血功能与胎龄、日龄但那个因素密切相关,目前尚无详尽的系统的文献报道。本研究采用全自动血凝仪及纤维蛋白单体聚合自动监测系统,测定了110例足月分娩正常新生儿的凝血三项纤维蛋白单体聚合功能。现报告如下。

1 对象与方法

1.1 对象 实验组收集郴州市妇幼保健院2010年6-12月期间,正常分娩婴儿110例,其中男59例,女51例,平均孕周38周+5,平均体重3 225g,Apgar’s 评分均为10分.对照组为本院健康体检者30例,其中男18例,女12例,年龄28~40岁。

1.2 仪器与试剂

1.2.1 仪器 法国Stago-STA全自动凝血仪;纤维蛋白单体聚合反应自动检测系统(西安医科大学)。

1.2.2 试剂 中国蕲蛇酶(广州蛇毒研究所);美国太平洋公司的凝血酶原试剂、活化部分凝血活酶试剂、纤维蛋白原试剂及配套定标物和质控物;Tris-HCl缓冲液:CaCl2 0.05mol/L,Tris 0.1mol/L,PEG-6000 20g/L,Tween-80 10g/L(ph7.45)。

1.3 方法

1.3.1 标本的采集 实验组:孕妇分娩时采集新生儿脐静脉血2.7mL,0.109mol/L枸橼酸钠0.3mL抗凝,3 000g离心15min,分离血浆,于-70℃保存。对照组采集静脉血,处理方法同上。

1.3.2 PT、APTT及FIB的测定 37℃水浴箱中快速复溶待测血浆,应用STAGO-STA血凝仪测定实验组和对照组的PT、APTT及FIB。

1.3.3 纤维蛋白单体聚合功能的测定[1-2]将中国蕲蛇酶用蒸馏水2.0mL复溶,再用Tris-HCl缓冲液将蕲蛇酶溶液作1:200稀释(终浓度1.25mg/L),得到反应混合液。调节分光光度仪波长到340nm,用反应混合液校正吸光度零点。启动纤维蛋白单体聚合反应自动检测系统。按计算机提示,设置反应时间。在光度仪比色皿(0.5cm)加50μL血浆样品,在25℃下平衡。然后加950μL反应混合液,启动血浆纤维蛋白单体聚合反应,迅速调节光度仪消光旋钮使吸光度为零。按任意键,计算机开始显示聚合反应的时间――吸光度曲线。当监测结束时,按计算机提示打印结果。

2 结果

2.1 凝血三项检测结果 110例新生儿与对照组凝血三项检测结果见表1,经t检验,新生儿组PT、APTT明显延长,FIB水平均明显低于对照组,各数据均存在显著差异(P<0.01)。

2.2 纤维蛋白单体聚合功能测定结果 110例新生儿与对照组纤维蛋白单体聚合功能检测结果见表2,经t检验,新生儿组FMPV、ODmax明显低于对照组,而FMPV/ODmax明显升高对照组,而FMPV/ODmax明显高对照组,各数据均存在显著差异(P

3 讨论 有资料表明,新生儿凝血因子的含量多少与孕妇的健康状况、胎龄、凝血因子通过胎盘的难易程度及新生儿的生理功能特点有关[3]。通常情况下,新生儿于生后数日内大多数凝血因子均低于正常儿童和成人。足月新生儿的维生素K依赖因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ均低于正常儿童与成人,其含量为成人的30%~60%,生后第一周开始上升,通常于生后2~12个月达到正常成人水平。因子Ⅺ、Ⅻ、前激肽释放酶(PK)、高分子量激肽原(HMWK)也低于儿童与成人,前者于出生后3个月,后者于出生后1~2周达成人水平[4]。我们的实验结果表明:新生儿的PT和APTT较对照组明显延长,而FIB的含量明显降低,间接反映新生儿的凝血因子水平不足。这一结果,与国内外的很多相关研究结论一致。目前,上述三个凝血系统的常规筛选试验在临床应用过程中,一直都在沿用成人的参考范围,而对于新生儿的参考范围尚未有明确规定。如前所述,人血浆中的各种凝血因子水平与人的年龄关系密切,不同日龄新生儿血浆中凝血因子、抗凝成分和纤溶系统的水平均差异很大[5],尤其是FIB,存在着明显的年龄增量问题,因此我们认为建立新生儿这一特殊人群的凝血试验的参考范围非常必要。

本研究中新生儿日龄均为1天,所测定结果仅代表出生后1周内的情况,并不代表整个新生儿时期。

我们通过纤维蛋白单体聚合功能监测系统,发现新生儿血桨纤维白单体聚合速率(FMPV)和反应最大吸光度(oDmax,反映纤维蛋白单体的聚合理和纤维蛋白原的含量的指标)均较对照组明显降低。但是两者的降低并不平行:即FMPV的下降并不及oDmax的下降明显。这就导致FMPV/oDmax――代表纤维蛋白单体反应性的指标并未减低,相反,与对照相比却有了明显的提高。我们研究的这一结果说明,尽管新生儿的纤维蛋白原水平较成人明显降低,但就单个纤维蛋白原分子而言,其反应性是增强的,新生儿血浆纤维蛋白单体聚合功能较正常成人升高,纤维蛋白原功能存在明显的功能亢进。

由于新生儿的凝血因子含量较低(在新生儿阶段各凝血因子含量仅相当于成人的30%~60%),加之血管脆性较高,肝功能不够完善,客观上容易发生出血性疾病。但许多研究资料表明,正常新生儿并不出现起自发性出血,我们推测这种生理现象,除了和新生儿时期出凝血系弘相互协调作用有关外[6],上述生理性的纤维蛋原功能增强的状态,很可能作为一种保护性的机制也参与了减少新生儿自发性出血的发生。当然,具体的机制如何,尚待我们的深入研究。

参考文献

[1] 吴峰,马西,车金.纤维蛋白单体聚合反应的光学检测法[J]. 中华血液学杂志,2008,15(1):42-43.

[2] 符明桂,马西.中国蕲蛇毒诱导纤维蛋白单体聚合过程的动力学分析:纤维蛋白原转变速率的测定[J].中华血液学杂志,2009,15(4):208-209.

[3] Gaffe P J Wong M Y. Collaborative study of a proposedia ternational standard for plasma fibrinogen measure ment[J].Thramb Haemost,2009,68:428-432.

[4] 刘泽霖,贺石林,李家增.血栓性疾病的诊断与治疗[M].北京:人民卫生出版社,2007.

[5] 李家增,贺石林,王鸿利. 血栓病学[M].北京:科学出版社,2008:8.

作者单位:423000 湖南省郴州市妇幼保健院检验科