TNF-a及嗜酸性粒细胞在鼻息肉中的表达及在激素治疗中的意义
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【摘要】目的：研究鼻息肉组织中TNF-α及嗜酸性粒细胞数在鼻息肉中的表达及在激素干预治疗中的意义。方法：采用原位杂交技术和HE染色观察鼻息肉和正常鼻黏膜组织中嗜酸性粒细胞的浸润情况，并在激素干预后再次检测鼻息肉组织中TNF-α和嗜酸性粒细胞数的表达，研究其两者之间的关系及意义。结果：鼻息肉中TNF-α表达的阳性细胞数、嗜酸性粒细胞数与正常鼻黏膜组织相比有显著差异，且鼻息肉中激素干预治疗前后TNF-α阳性细胞数与嗜酸性粒细胞都存在明显相关性。结论：TNF-α能促进嗜酸性粒细胞在鼻息肉组织中的浸润，且在激素干预治疗中能作为靶点影响EOS的下调，表明TNF-α在鼻息肉嗜酸性粒细胞浸润的发病过程和激素干预治疗中发挥着重要作用。
【关键词】鼻息肉；肿瘤坏死因子-α；嗜酸性粒细胞
【中图分类号】R765.25【文献标识码】B文章编号：1004-7484（2012）-05-0787-02鼻息肉作为耳鼻咽喉科多发病，一般采用外科手术治疗加药物巩固治疗。本文就TNF-α及嗜酸性粒细胞数在鼻息肉中的表达及激素治疗前后两者的改变做一研究，以期了解TNF-α在鼻息肉嗜酸性粒细胞浸润过程中的作用以及在激素治疗中的意义。1.资料与方法
1.1临床资料：所有标本均取自于南华大学附属南华医院耳鼻咽喉科2009年12月-2010年5月鼻科手术中切下的新鲜标本。鼻息肉组：取自于确诊为鼻息肉并接受鼻内镜下手术切除的患者，一组标本于入院激素治疗前取得，并予以地塞米松，10mg，静滴，1次/日×5天，第6日手术后再取得另外一组标本，共25例，其中男性15例，女性10例。所有标本手术取得后立即用4%甲醛溶液（内含有1/1000DEPC）予以固定，常规脱水，石蜡包埋。
1.2染色方法：
1.2.1原位杂交染色：原位杂交染色试验步骤按照原位杂交检测试剂盒说明书进行。
1.2.2HE染色；嗜酸性粒细胞观察和计数采用苏木精-伊红常规染色。
1.3结果判断：采用盲法阅片。
1.4统计分析：采用SPSS13.0，激素治疗前后采用t检验，直线相关分析。2.结果
2.1嗜酸性粒细胞浸润情况：HE中的表达情况，（见图1、2）。原位杂交染色见TNF-α在鼻息肉组织多种炎性细胞中都有表达，而在正常鼻黏膜组织表达非常少见，两者表达阳性细胞数有显著差异（P﹤0.05）。
经统计分析证实鼻息肉组织中嗜酸性粒细胞计数比对照组明显要高（P﹤0.05），具体数据，（见表1）。鼻息肉中TNF-α和EOS表达的阳性细胞数与对照组相比有显著差异（P﹤0.05），具体数据，（见表1）。
图1 鼻息肉组织HE染色（×400)图2鼻息肉组织中TNF-α的表达(×400)
表1鼻息肉组织TNF-α结果
分组例数干预措施TNF-α阳性细胞数E0S记数鼻息肉组25激素治疗前30.60±19.4430.96±32.33激素治疗后20.48±10.5018.36±20.15对照组116.18±5.174.90±3.622.2相关性分析结果：鼻息肉组织中激素治疗前TNF-α阳性细胞数与嗜酸性粒细胞数存在显著相关性（r=0.423；P﹤0.05）；鼻息肉组织中激素治疗后TNF-α阳性细胞数与嗜酸性粒细胞数同样也存在显著相关性（r=0.506；P﹤0.05）。3.讨论
鼻息肉发病率占总人口的1%-4%，在耳鼻咽喉科是常见且严重影响患者生活质量的疾病。但关于其发病机制至今仍然未被阐明，大多数鼻息肉中有较多嗜酸性粒细胞浸润，提示鼻息肉与嗜酸性粒细胞增多有密切关系，后者表面带有丰富的调节免疫反应的受体，是许多细胞因子的重要来源，且EOS细胞内含有大量的细胞毒性蛋白参与鼻息肉的发病过程。
TNF-α在鼻息肉的发病过程中也同样发挥着重要作用，国内学者王相成［1］等研究发现在鼻息肉的发病机制中，其研究中还发现TNF-α在鼻息肉血管内皮的表达高于对照组。本实验表明TNF-α在鼻息肉中表达异常增高，其与正常组下鼻甲粘膜组织相比，具有统计学差异，同时其阳性细胞数与EOS计数明显相关，提示TNF-α在鼻息肉EOS的浸润过程中发挥着重要作用，这与王相成研究结论吻合。这一研究证实TNF-α能通过诱导血管粘附因子的表达来促进EOS的在鼻息肉中的浸润。
本实验通过表明，应用激素治疗后TNF-α阳性细胞数和EOS数目都出现明显较大程度下降，相关性研究表明激素治疗后其两者仍然存在显著相关性，提示激素治疗后EOS的下降与TNF-α表达下调机制有关，可能与TNF-α能下调多种血管粘附因子和趋化因子表达以及降低血管通透性等方面来减少EOS的浸润。综合分析TNF-α在鼻息肉嗜酸性粒细胞浸润机制过程中作为极其重要的炎症因子在其发病和治疗干预过程中都有着非常重要的意义，但其具体作用机制有待进一步研究。参考文献
［1］王相成，李玲香.p38MAPK信号传导通路关键靶点基因及肿瘤坏死因子在鼻息肉组织中的表达与意义.中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志，2008，16(3)：161-165.