紫草油提取工艺的研究

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摘要：目的：优选麻油提取紫草素的最佳提取工艺。方法：以左旋紫草素含量为指标，应用正交实验设计，筛选紫草油的最佳提取工艺。结果：取紫草加6倍麻油量、提取温度60℃、提取时间2h，可制备最佳紫草素。

关键词：紫草素；提取工艺；正交试验

中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2008)04-0861-02

紫草为紫草科植物新疆紫草Arnebia euchroma(Royle)johnst．或内蒙紫草drnebia guttata Bunge．的干燥根。史载于《神农本草经》，味苦、性寒、具有凉血解毒透疹之功效。用于血热毒盛、斑疹、麻疹不透、疮疹湿疹、水火烫伤［1］。紫草中的主要成分为萘醌类色素，主要有乙酰紫草素、紫草素等［3］。紫草素具抗炎［4］、促进肉芽组织生成［5］等药理作用。传统工艺多采用高温油炸或冷浸过夜等方法来制备紫草油。本实验采用正交试验法，以左旋紫草素为指标，对提取油量、提取温度和提取方法3个因素进行考察，以期能优选出麻油提取紫草素的最佳工艺。

1仪器与试药

1．1仪器

TU-1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；双列4孔电热恒温水浴锅(山东医疗器械厂)；KDM型调温电热套(山东省鄄城光明仪器有限公司)；DHE-600型多功能红外快速干燥箱(杭州蓝天化验仪器厂)；普利赛斯XS系列原装天平。

1．2试药

紫草原药材(济南药业集团有限责任公司中药饮片厂，批号20070305)；左旋紫草素对照品(中国药品生物制品检定所，1l01769―2004050：麻油（济南药业集团)。

2实验方法

2．1正交实验设计

通过考察，确定紫草的提取油量、提取温度、提取时间3个因素，设计采用3因素3水平，选用L9(34)正交试验进行实验，因素水平见表1。

2．2样品中紫草素提取量测定

2．2．1样品溶液制备称取紫草药材10g粉碎，加入适量麻油浸渍24h，按L9(34)正交表安排提取滤过，收集合并麻油提取液至100mL容量瓶中，加麻油至刻度，得供试品溶液A1～A9，待测。

2．2.2标准曲线的绘制精密称取左旋紫草素标准品4．7mg置25mL容量瓶中，加麻油溶解并稀释至刻度，得浓度约为0．188mg／mL的左旋紫草素对照品溶液，作为标准品储备液(Ⅰ)。再分别精密吸取Ⅰ液0．4、0．8、1．2、1．6、2．0mL，分别加麻油定容于10mL容量瓶中，按分光光度法，以麻油作空白对照，在516nm处测定吸收度。用最小二乘法，以吸收度值(A)为纵坐标，以对照品浓度(C)为横坐标，绘制标准曲线，求得回归方程为：A=0．0215C+0．0435 r=0．9990，说明左旋紫草素浓度在7．52～45．12μg／mL的范围内有良好的线性关系。

2．2．3精密度实验精密量取样品A8 0．5mL置10mL容量瓶中，用麻油稀释至刻度，再精密吸取稀释液2．0mL加麻油定容至10mL。以麻油为空白，在516nm下用紫外分光光度计连续测定6次，RSD为0．625％，表明精密度良好。

2．2．4稳定性试验日内稳定性：取样品A8，按照精密度试验项下测定方法，每小时测1次，连续测定6h，RSD为0．470％，表明样品稳定性良好。

2．2．5加样回收率试验精密量取样品A8 2．0mL 5份，分别加入标准品储备液(Ⅰ)0．4、0.4、0．4、0．6和0．6mL：得供试品溶液B1～B5。以麻油作空白，在516nm波长下测定吸收度，测得平均回收率为101．2％，RSD为0．6067％。

2．2．6供试品含量测取得批次样品，按照精密度项下测定方法操作，得供试品溶液C1～C9。按分光光度法，以麻油作空白，在516nm处测定吸光度，结果见表2。

3实验结果

紫草素提取量的正交试验结果：从表3可知，极差(R)最大的为A因素，其次分别为C因素B因素，说明在麻油提取紫草素工艺中，对提取量影响最大的因素为提取油量，其次分别为提取时间、提取温度。

方差分析结果：从表4可知，A因素3个水平之间有显著性差异(P0．1)。确定最佳提取工艺为A2、B1、C2。即最佳提取油量为6倍量，提取温度为60℃，提取时间为2h。

4验证实验

取10g粉碎的紫草加6倍量麻油浸渍24h，在最佳提取条件下提取，按照样品含量测定项下方法，在516nm处测定吸收度。重复实验3次，取平均值，结果见表5。

5讨论

正交设计法对紫草油的提取工艺条件研究表明，影响紫草油提取率的因素依次为：提取油量>提取时间>提取温度。最佳工艺条件为：提取油量为6倍，提取时间为2h，提取温度为60℃。

按照确定的工艺条件，进行验证实验。结果表明，测定结果几乎等于或优于相应的正交表中的任何一组。

紫草主含紫草素，紫草素不溶于水，可溶于醇、有机溶剂和植物油。麻油与紫草素结构相似，作为提取溶剂，不仅可以得到较高的溶出量，也是良好的成型基质，具有润泽肌肤抗氧化等作用［6］。

曾有文献报道［7］，用苯、90％乙醇回流和麻油3种溶剂提取紫草油，乙醇回流提取方法得到的含量最高。考虑到对皮肤溃疡患者慎用乙醇的用药特殊性［8］及苯的毒性等因素，麻油应为最佳提取溶剂。

紫草中主要有效成分为乙酰紫草醌、紫草醌、紫草烷等脂溶性成分。有试验证明紫草中萘醌类色素成分具有对热不稳定性。紫草素在加热60℃以上颜色中华中医药学刊由红色变成紫黑色，随温度升高变化速度加快，薄层色谱法检查斑点消失提示紫草素被破坏［9］。传统工艺采取的大火煎炸，容易使紫草素发生变异。本实验采用正交设计法确定最佳提取温度为60℃，不仅危险性小、利于操作、回收率也较高。

参考文献

［1］王珠劳，祝丽琴，高志军，等．复方紫草油治疗烧烫伤305例［J］.新中医，2001，33(12)：53．

［2］葛锋，王晓东，王玉春．药用紫草得研究进展［J］．中草药，34(9)：附6-附9．

［3］严松柏，谈献和，胡玉涛．紫草得研究进展［J］.时珍国医国药，2003，14(2).

［4］王文杰，白金叶，刘大培，等，紫草素抗炎及对白三烯β-生物合成得抑制作用［J］.药学学报，1994，29(3)：16．

［5］吴皓．右旋紫草素和紫草素促进大鼠肉芽组织增生得组织学研究［J］.国外医学•中医中药分册，2003，25(3)：163．

［6］胡春，杜文群．芝麻中抗氧化成分［J］．广州化工，1996，24(1)：14-18．

［7］杨秀芳．正交实验法优选紫草得提取工艺［J］.中成药，2003，27(3)．

［8］王春丽，唐汉钧，余敏英，等.麻油提取紫草工艺条件优选［J］．方药缆胜，2005．

［9］阴健．中药现代研究与临床应用［M］．北京：中医古籍出版，1993：634．