HPLC测定抗感冒片中对乙酰氨基酚含量
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[摘要] 目的：建立用hplc测定抗感冒片中对乙酰氨基酚的含量。方法：色谱柱为Symmetry C18(4.6 mm×150 mm，5 μm)；流动相为甲醇-水（15∶85）；柱温为30℃，流速为1.0 ml/min，检测波长为257 nm。结果：对乙酰氨基酚在4.998~499.8 μg/ml范围内呈良好的线性关系（r=0.999 4，n=5），平均回收率为100.66%，RSD为1.3%。结论：本方法简便、快速、准确，适应于抗感冒片中对乙酰氨基酚的含量测定。
[关键词] HPLC；抗感冒片；对乙酰氨基酚；含量测定
[中图分类号]R917 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）07（c）-040-02
Content determination of paracetamol in Kangganmao Tablets by HPLC
ZENG Zhi-jian1，JIANG San-yuan2
(1.Jiangmen Institute for Drug Control, Jiangmen 529030,China;2.Xinhui Hospital of Traditional Chinese Medicine, Jiangmen 529100,China)
[Abstract] Objective: To establish determination method for the content of paracetamol in Kangganmao Tablets. Methods: The chromatographic column was Symmetry C18(4.6 mm×150 mm，5 μm), the mobile phase consisted of methanol- water(15∶85),the column temperature was 30℃,the flow rate of 1.0 ml/min,the UV detection wavelength was 257 nm.Results: The linear range of concentration of paracetamol was 4.998~499.8 μg/ml.The average recovery was 100.66% with RSD of 1.3%.Conclusion: The method is simple,fast and accurate. It is suitable for content determination of paracetamol in Kangganmao Tablets.
[Key words] HPLC; Kangganmao Tablets; Paracetamol; Content determination
抗感冒片是江门市新会区中医院自制的中西药复方制剂，具有疏散风热，祛痰利咽之功效。用于头痛发热、喷嚏频发、流鼻涕等风热感冒症。在质量控制中，其原方法[1,2]采用亚硝酸钠法和差示光谱法测定对乙酰氨基酚的含量，都要进行重氮化反应，方法较复杂且重现性较差，本文采用HPLC法，操作简便，重现性好，结果准确，现报道如下：
1仪器与试药
1.1仪器
Agilent 1200型高效液相色谱仪、LC系统化学工作站；BS124S型电子天平（北京赛多利斯仪器有限公司）；BU3120型超声仪。
1.2试药
抗感冒片（江门新会区中医院，批号：070126、070615、070817、071127）；对乙酰氨基酚（中国药品生物制品检定所提供，批号：100018-200408）；甲醇为色谱纯，水为纯水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为Symmetry C18 (4.6 mm×150 mm，5 μm)，以甲醇-水（15∶85）为流动相，检测波长257 nm[3]，检测灵敏度为2.000 AUFS，流速1.0 ml/min，10 μl定量管进样，柱温为30℃。
2.2 供试液的制备
2.2.1对照品溶液精密称取对乙酰氨基酚对照品0.099 96 g，置200 ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液（浓度为499.8 μg/ml）。
2.2.2 供试品溶液的制备取样品10片，除去糖衣层，研成细粉，取粉末约0.1 g，精密称定，置50 ml量瓶中，加水45 ml，超声30 min使溶解，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1 ml，置10 ml量瓶中，，加水至刻度，摇匀，用0.45 μm滤膜过滤，取续滤液作供试品溶液。
2.2.3 阴性对照品溶液的制备按处方制备不含对乙酰氨基酚的样品，按“2.2.2”项下供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。
2.3 专属性试验
分别吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，记录色谱图（图1~3）。
2.4 线性关系的考察
取“2.2.1”对照品溶液为A液（浓度为499.8 μg/ml）；精密量取对照品溶液2 ml置10 ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀得B液（浓度为99.96 μg/ml）；精密量取B液5 ml置10 ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀，得C液（浓度为49.98 μg/ml）；精密量取C液2 ml置10 ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀，得D液（浓度为9.996 μg/ml），精密量取D液5 ml置10 ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀，得E液（浓度为4.998 μg/ml）。取A、B、C、D、E液，分别进样10 μl，以浓度(C)为横坐标，峰面积(A)为纵坐标，得回归方程为：A=23.597C-272.54，r=0.999 4 (n=5)。
2.5 回收率测定
取批号070126的样品(242.99 mg/g)细粉约0.05 g，精密称定，每份各加入对照品溶液25 ml（含对乙酰氨基酚12.495 mg），按样品测定项下处理，进样10 μl，外标法计算，测得对乙酰氨基酚回收率为100.66%，RSD=1.3%，可见回收率良好，结果见表1。
2.6 重现性试验
取同一批样品，制备供试品溶液6份，按含量测定方法测定。以对乙酰氨基酚含量统计，RSD=0.8%，重现性良好。
2.7 精密度试验
取对照品溶液10 μl，重复进样6次，记录峰面积，RSD为1.0%（n=6）。
2.8 稳定性试验
精密吸取供试品溶液10 μl，分别在0、2、4、6、8、12 h测定，结果显示12 h内，溶液中对乙酰氨基酚面积的RSD为0.9%（n=6），稳定性较好。
2.9 样品测定
取批号070126、070615、070817、071127样品，照“2.2.2”供试液的制备，按外标法计算样品中对乙酰氨基酚的含量（mg/g），结果见表2。
3讨论
高效液相法测定制剂中对乙酰氨基酚含量的研究较多，有报道使用甲醇-水-冰醋酸(20∶80∶0.5)等流动相。本文对其进行简化，以甲醇-水（15∶85）为流动相，结果显示对乙酰氨基酚的峰形、与杂质的分离度、塔板数等均无明显差异。
抗感冒片是中西药组成的复方制剂，测定抗感冒片中对乙酰氨基酚的含量，其他中药等成分均无干扰，该方法简单、可行，重复性好，适用于抗感冒片中对乙酰氨基酚的含量测定。
抗感冒片中的金银花、野均含有绿原酸成分，以绿原酸为对照，用薄层色谱法作定性鉴别，效果良好。
[参考文献]
[1]广东省卫生厅.广东省药品药品标准（上册）[S]. 1987.233.
[2]蒋三元，黄锦源，张健民.差示光谱法测定抗感冒片中对乙酰氨基酚含量[J].中国药师，2002，5（4）：211.
[3]林绍乐.HPLC法测定康必得中对乙酰氨基酚的含量[J].海峡药学，2004,16(4) : 71-72.
（收稿日期：2008-04-10）
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