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[摘要] 目的:建立治伤丸的定性鉴别方法。方法:采用显微鉴别法及薄层色谱法对治伤丸进行定性分析。结果:建立了显微鉴别方法及丹参、赤芍的薄层色谱鉴别方法。结论:此方法简便、可靠、重复性好,可用作该制剂的质量控制。
[关键词] 治伤丸;显微鉴别法;薄层色谱法;冬虫夏草;丹参;赤芍
[中图分类号] R927.2[文献标识码] B[文章编号] 1673-7210(2010)04(a)-095-02
Study on the quality control of Zhishang Pills
CHEN Xiaoyan1, CHEN Weihong2
(1.The Third Hospital of Changsha, Changsha 410015, China; 2.Hunan University of Traditional Chinese Medicine, The Second Affiliated Hospital, Changsha 410005, China)
[Abstract] Objective: To establish a qualitative method for the identification of Zhishang Pills. Methods: Microscopic identification method and thin-layer chromatography were used for the qualitative analysis of Zhishang Pill. Results: The microscopic identification method and thin-layer chromatography identification of Salvia Miltiorrhiza Bge. and Radix Paeoniae Rubra were established. Conclusion: This method is simple, reliable, and reproducible and can be used in the quality control of the preparation.
[Key words] Zhishang Pill; Microscopic identification method; Thin-layer chromatography; Cordyceps sinensis; Salvia Miltiorrhiza Bge.; Radix Paeoniae Rubra
治伤丸是由丹参、赤芍、冬虫夏草等8味中药制成的,具有活血祛瘀,消肿止痛,接骨续筋的功效。用于跌打损伤,新旧骨折,腰肌劳损等症。为了控制该制剂质量,保证临床用药安全,本文采用显微鉴别法对该制剂中的冬虫夏草进行鉴别;采用薄层色谱法对该制剂中丹参、赤芍进行了鉴别,方法简便可靠,可用于该制剂的定性鉴别。
1 试药与仪器
1.1 仪器
PEPROSTAR3紫外检测仪(日本岛津);KQ-300DE超声清洗器(常州诺基仪器有限公司);电子天平(德国startorius);Olympus显微镜(日本)。
1.2 试药
丹参酮ⅡA对照品(批号:110766-200417,中国药品生物制品检定所);丹参对照药材(批号:120923-200610,中国药品生物制品检定所);芍药苷对照品(批号:0736-200219,中国药品生物制品检定所);硅胶G(青岛海洋化工厂,薄层层析用);其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 显微鉴别法[1]
取经鉴定的冬虫夏草适量,研成细粉,制片,置显微镜下观察:菌丝成束,无色,细长,分枝或不分枝,具分膈。
取治伤丸样品适量,研成细粉,制片,置显微镜下观察:菌丝成束,无色,细长,分枝或不分枝,具分膈。制备10张片,有8张可观察到上述特征。
2.2 丹参的薄层鉴别
2.2.1 对照品溶液的制备取丹参酮Ⅱ A对照品,加甲醇溶液制成每毫升含1 mg的溶液,作为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备[2-4]取本品15 g,研细,加乙醚40 ml,振摇提取10 min,滤过,滤液挥干,残渣加乙酸乙酯1 ml使溶解,作为供试品溶液。
2.2.3 对照药材溶液的制备 取丹参对照药材1 g,同“2.2.2”项下方法制成对照药材溶液。
2.2.4 阴性对照药材溶液的制备取除丹参外的其余处方药材,制成缺丹参的阴性对照样品,同“2.2.2”项下方法制成缺丹参的阴性对照溶液。
2.2.5 薄层层析照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录Ⅳ B)试验,吸取供试品溶液、阴性对照溶液各20 μl,对照药材溶液、对照品溶液各5 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(30~60℃)-乙酸乙酯(18∶1)为展开剂,展开,取出,晾干。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,缺丹参的阴性对照无干扰,见图1。
2.3 赤芍的薄层鉴别
2.3.1 对照品溶液的制备取芍药苷对照品,加甲醇溶液制成每毫升含1 mg的溶液,作为对照品溶液。
2.3.2 供试品溶液的制备[5]取本品3 g,研细,加50%乙醇溶液40 ml,超声处理30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加水20 ml使溶解,加正丁醇振摇提取2次,每次20 ml,合并正丁醇液,再加氨试液10 ml洗涤1次,弃去碱液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇溶液1 ml使溶解,作为供试品溶液。
2.3.3 阴性对照药材溶液的制备取除赤芍外的其余处方药材,制成缺赤芍的阴性对照样品,同“2.3.2”项下方法制成缺赤芍的阴性对照溶液。
2.3.4 薄层层析照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录Ⅳ B)试验,吸取供试品溶液与阴性对照溶液各10 μl、对照品溶液5 μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,缺赤芍的阴性无干扰,见图2。
3 讨论
冬虫夏草属于贵细药,需要有鉴别项以控制和保证质量。因制剂中含量很少,故采用显微鉴别法来控制质量。
在丹参的薄层色谱中,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,有4~5个相同颜色的斑点,丹参酮ⅡA斑点已经包含在丹参对照药材色谱中,故对丹参鉴别采用以丹参对照药材为对照较好。
丹参中含有含菲醌类化合物:如丹参酮Ⅰ(Tanshinone Ⅰ)、丹参酮ⅡA(Tanshinone ⅡA)等;赤芍含芍药苷(Paeoniflorin)、氧化芍药苷(Oxypaeoniflorin)等成分、冬虫夏草含氨基酸、多糖、粗纤维等[6-8]。根据各药味的成分,设计薄层色谱鉴别方法,结果表明方法可行。
[参考文献]
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(收稿日期:2009-12-15)