HPLC法测定桂丹莪棱口服液中芍药苷的含量

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[摘要] 目的 建立桂丹莪棱口服液的质量标准。 方法 采用hplc法对桂丹莪棱口服液中芍药苷的含量进行测定。 结果 桂丹莪棱口服液中芍药苷的含量在0.308 2～6.164 0 μg的范围内，有良好的线性关系，r = 0.999 9，平均回收率为98.68%，RSD = 1.01%，桂丹莪棱口服液中芍药苷的含量为1.392 mg/mL。 结论 建立了桂丹莪棱口服液的质量标准，该方法操作易行，稳定可靠，可用于桂丹莪棱口服液中芍药苷的含量及该制剂的质量控制。

[关键词] 桂丹莪棱口服液；芍药苷；高效液相色谱法

[中图分类号] R927.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2012）04（a）-0139-02

Contents determination of Paeoniflori in Guidan′eleng Mixture by HPLC

DENG Songyue1 WANG Weili1 ZHU Mingwei1 YANG Wenwen2

1.Shangqiu Institute for Food and Drug Control, He′nan Province, Shangqiu 476000, China; 2.Tianjin Tiens Group Co. Ltd, Tianjin 301700, China

[Abstract] Objective To establish the standard for determination of Paeoniflori in Guidan′eleng Mixture. Methods Paeoniflori in Guidan′eleng Mixture were determined by HPLC. Results The linear range of Paeoniflori was 0.308 2-6.164 0 μg, r = 0.999 9. The average recovery of Paeoniflori was 98.68% and RSD was 1.01%. Contents determination of Paeoniflori in Guidan′eleng Mixture was 1.392 mg/mL. Conclusion The method is simple, sensitive and accurte, and can be used to determine Paeoniflori and as the quality control of Guidan′eleng Mixture.

[Key words] Guidan′eleng Mixture; Paeoniflori; HPLC

桂丹莪棱口服液是经批准生产的医院中药制剂[1]（豫药制字Z04140016），处方由赤芍、桂枝、牡丹皮、茯苓、益母草、丹参、香附、莪术等11味药组成，具有消炎止痛、活血化瘀、消瘕的功效。经过多年的临床应用证明其治疗慢性盆腔炎、子宫内膜异位症、卵巢囊肿、子宫肌瘤、炎性包块等症功效显著。赤芍为处方中主药，芍药苷为其有效成分，为保证制剂质量的稳定可靠，采用高效液相法对制剂中的芍药苷进行了含量测定，提高制剂标准。

1 仪器与试药

Agilent1260高效液相色谱仪；色谱柱Agilent-C18（4.6 mm×150.0 mm，5 μm），AUW220D电子天平，芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110736-201035，供含量测定用），桂丹莪棱口服液（商丘市柘城县人民医院提供，批号：110411、110630、110726）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[2]

Agilent-C18色谱柱（150.0 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86），检测波长为230 nm，流速为1.0 mL/min，进样量为10 μL。理论塔板数按芍药苷峰计算不的低于2 000。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取对照品芍药苷，精密称定15.41 mg，置50 mL量瓶中，加稀乙醇溶解稀释至刻度，摇匀。

2.2.2 供试品溶液的制备[2-3] 取供试品混匀，精密量取5 mL，置50 mL量瓶中，加35 mL稀乙醇，振摇，并加稀乙醇至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液。

2.2.3 阴性对照品溶液的制备 除赤芍外，其他各药按处方量投料，然后按“2.2.2”项下方法配制阴性对照品溶液。

2.3 系统适应性试验

取上述阴性对照溶液、对照品溶液、供试品溶液适量，注入高效液相色谱仪，记录色谱图（图1）。

2.3.1 线性关系考察 取30.82 μg/mL对照品标准溶液：1、5、7.5、10、15、20 μL各进样两次，芍药苷的保留时间为6.68 min（芍药苷：色谱峰中1峰），记录芍药苷峰面积积分值，以峰面积积分值（Y）对进样量（X，单位：μL）进行回归，得到回归方程为：Y = 94.803X + 2.865，r = 0.999 9。结果表明其线性关系良好，线性范围为0.308 2～6.164 0 μg。

2.3.2 精密度试验 精密吸取对照品溶液10 μL，6次重复进样，测定各次峰面积。结果RSD = 0.43%。

2.3.3 重复性试验 称取同一批（批号：110630），精密称定样品6份，照“2.2.2”项下方法制备，进样，测定。结果，平均含量为1.396 mg/mL，RSD = 1.03%。

2.3.4 稳定性试验 取供试品溶液（批号：110630），分别于0、1、2、4、8、12 h精密吸取10 μL，进样，测定。结果RSD = 0.77%，表明供试品溶液在12 h内稳定。

2.3.5 加样回收率试验 取已知含量的样品共6份（批号：110630），分别精密量取1 mL，置100 mL量瓶中，分别精密加入同一浓度（0.154 1 mL/mL）的芍药苷对照品，照“2.3”项下方法制备，进样10 μL，测定，计算芍药苷的加样回收率。结果见表1。

2.4 样品含量测定

按上述含量测定方法，测定3批样品（批号为110411、110630、110726）中芍药苷含量，测定结果见表2。

3 讨论

在供试品制备的的过程中，由于中药成分的多样与复杂性，曾考虑到其他样品对赤芍的影响，比较了振摇、超声和回流[4-5]不同提取方法的提取，可能是因为本制剂为口服液，提取较容易，结果回流30 min、超声提取30 min和振摇的效果差不多，考虑到操作的方便性，可操作性，本实验采取了振摇提取。

桂丹莪棱口服液是长期使用的医院制剂，实践证明，疗效良好，但是一直以薄层鉴别作为该制剂质量控制的标准，没有具体的定量控制方法，根据处方和药理作用确定赤芍是桂丹莪棱口服液的主药，所以本实验用HPLC法对桂丹莪棱口服液中芍药苷的含量进行测定[6-8]。通过实验研究，建立了桂丹莪棱口服液制剂的质量定量控制方法，而且经考察该方法稳定可靠，专属性较强，可作为桂丹莪棱口服液制剂的质量定量控制的参考。

[参考文献]

[1] 河南省食品药品监督管理局.河南省医疗机构制剂标准[S].豫药制字：Z04140016.

[2] 国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社，2010：96.

[3] 凌明，马安宇.HPLC测定胃肠合剂中芍药苷和黄芩苷的含量[J].中成药，2008，30（9）：1311-1113.

[4] 陈晓燕，李顺祥.HPLC法测定阿归养血糖浆中芍药苷含量[J].中医药导报，2009，15（3）：81-83.

[5] 马连英，于秀华，李长惠.高效液相色谱法测定血府逐瘀口服液中阿魏酸含量[J].药物鉴定，2006，15（16）：28.

[6] 李越峰，杨武亮，沈菲，等.高效液相色谱测定白芍中芍药苷的含量[J].时珍国医国药，2008，19（2）：438-439.

[7] 刘洁.反相高效液相色谱法测定白芍提取物中芍药苷的含量[J].时珍国医国药，2010，21（9）：125.

[8] 周芳芳.RP-HPLC法测定精制冠心颗粒中芍药苷含量[J].黑龙江医药，2011，17（3）：286.

（收稿日期：2011-12-09 本文编辑：卫 轲）