索氏提取法提取蓝莓原花青素优化条件的初探
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摘要：采用索氏提取法研究各种不同条件对蓝莓原花青素提取率的影响，运用紫外分光光度法进行测定，通过单因素试验分析蓝莓原花青素的最佳提取条件：乙醇体积浓度约 60%，温度90℃，pH为 4，料液比为1g：10ml，提取5h为最佳提取条件。
关键词：蓝莓 原花青素 索氏提取法 紫外分光光度法
一、引言
原花青素（proanthocyanidin.PC）又称原花色素，作为一种天然食用色素，安全、无毒、资源丰富，而且具有一定营养和药理作用，在食品、化妆、医药等方面有着巨大的应用潜力。花青素广泛存在于橡树、七叶树、榛木、山楂、苹果、浆果、大麦、豆荚、大黄、高粱和蔷薇果等高等植物的器官组织中，蓝莓中也含有原花青素且蓝莓果实含有的原花青素是所有的水果与蔬菜之中含量最多。蓝莓果实营养丰富，除含有常规的糖、酸、VC。矿物元素外，还含有尼克酸、黄酮等特殊成分。对蓝莓资源进行合理利用，对提高产品附加值具有重大意义，通过索氏提取法单因素试验分析优化条件，希望为蓝莓原花青素的开发和应用提供一定的理论基础。
二、试验部分
1.实验仪器：索氏提取器、研钵、分光光度计、PH计。
2.实验药品：盐酸分析纯、乙醇分析纯、醋酸钠。
3.实验方法：取约5.00g蓝莓浆，用索氏提取仪提取，0.1mol/l在盐酸乙醇溶液（8.3ml浓盐酸用95%乙醇稀释成1L）浸提5h后，以0.1 mol·L-1的盐酸乙醇溶液做参比液，在分光光度计测定提取液在530nm波长下的吸光度。
三、结果与讨论
1、实验结果
①乙醇体积浓度对提取率的影响（见图1）
称取4份样品，每份5.00g，分别取50ml体积浓度40%、60%、80%、100%盐酸乙醇溶液，用索式提取法在90℃提取5h，过滤，以0.1 mol·L-1的盐酸乙醇溶液做参比液，在分光光度计测定提取液在530nm波长下的吸光度值
结果表明，原花青素的提取率先随提取剂浓度增大而增加，但产生峰值后开始降低。在50%到70%之间出现峰值，处于较高的吸光度值。当乙醇体积浓度大于60%以后，原花青素提取率开始下降。这可能是由于溶剂的极性变化所致，原花青素的溶出率与溶剂极性有关，极性相似可达到最大溶出率。
②温度对提取率的影响（见图2）
称取4份样品，每份5.00g，取体积浓度60%盐酸乙醇做溶剂，料液比为 1g：10ml，分别在30℃、50℃、70℃、90℃下进行提取5h 过滤。以0.1 mol·L-1的盐酸乙醇溶液做参比液，在分光光度计测定提取液在530nm波长下的吸光度值。
结果表明，原花青素提取率随温度升高表现出逐渐增加的变化趋势，但是过高温容易造成原花青素不稳定，可能产生部分分解。90℃为宜。
③料液比对提取率的影响（见图3）
称取4份样品，每份5.00g，分别取50ml体积浓度为60%盐酸乙醇溶液，90℃水浴条件下，分别以料液比1g：10ml、1g：15ml、1g：20ml、1g：25ml浸提5h过滤，以0.1 mol·L-1的盐酸乙醇溶液做参比液，在分光光度计测定提取液在530nm波长下的吸光度值。
结果表明，提取剂用量越大提取效果越好，但是用量大到一定程度提取率急剧降低，料液比为1g∶10 mL 效果最好。
④pH 值对提取率的影响（见图4）
称取4份样品，每份5.00g，取盐酸乙醇体积浓度为60%，分别调节PH为4、5、6、7，90℃水浴条件下，料液比1g：10ml 浸提5h过滤，以0.1 mol·L-1的盐酸乙醇溶液做参比液，在分光光度计测定提取液在530nm波长下的吸光度值。
结果表明，不断增加体系的pH 值，提取率呈现不规则变化，在pH4～5 范围内提取率变化不明显，在pH在6～7范围内明显降低。
⑤提取时间对提取率的影响（见图5）
称取4份样品，每份5.00g，乙醇体积浓度为60%，分别调节PH为4、5、6、7，90℃水浴条件下，料液比1g：10ml 浸提5h过滤，以0.1 mol·L-1的盐酸乙醇溶液做参比液，在分光光度计测定提取液在530nm波长下的吸光度值。
结果表明，随着提取时间的延长，提取率有所增加但变化缓慢4h-5h 时提取率最高。
四、结论
索氏提取法提取蓝莓原花青素的最佳提取条件为：乙醇体积浓度60%、温度为90℃、pH 为4、料液比为1g∶10 mL、提取时间5h。
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