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健体Ⅰ号对运动性疲劳大鼠抗疲劳效果的观察

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摘要:目的:观察运动性疲劳对SD大鼠血清肌酸激酶(CK)与糖元含量的影响,探讨中药复方健体Ⅰ号对运动性疲劳的预防作用。方法:30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、实验组。模型组及实验组大鼠进行3周每天4 h的游泳训练,实验组游泳前30 min予16.8 g/kg/d剂量健体Ⅰ号水煎液,模型组予同等量的生理盐水,正常组不作任何处理。于3周后取样测定血清肌酸激酶、血糖、肝糖原、肌糖原及取肝肾组织作病理切片检查。观察运动性疲劳大鼠血清CK、肌糖元、肝糖元的变化及中药复方健体Ⅰ号水煎液对上述指标的影响。结果:与正常组比较,模型组的血清肌酸激酶含量明显偏高(P

关键词:健体Ⅰ号;运动性疲劳;肌酸激酶;糖元

中图分类号:G804.52 文献标识码:A 文章编号:1007-3612(2012)03-0060-03

运动性疲劳是机体经过长时间的运动后,出现的运动能力暂时下降,机体生理过程和心理过程不能持续其机能在特定水平上和维持预定的运动强度,是机体各种复杂内在变化的一种综合外在表现,存在多组织、多器官、多系统、多层次的复杂变化,在状态医学中属亚临床状态。目前中医药抗运动性疲劳的文献报道较多,但多以补为主。现代研究认为疲劳不仅可以引起精气血的耗损,也可致肝郁气滞、痰湿瘀血停留。故从补虚泻实的角度拟定中药复方健体Ⅰ号,探讨其对抗运动性疲劳的作用,为抗运动性疲劳的研究提供实验依据。

1、材料和方法

1.1 实验动物 成年雄性SPF级SD大鼠30只,体重(200±10)g,由重庆市中药研究院提供[SCXK(渝)2007-0006]。大鼠在室温20℃~26℃,照明12h条件下适应性喂养1周,随机分成正常组、模型组、实验组,每组为10只。

1.2 健体1号的组成和制备

1.2.1 组成 健体1号由黄芪30 g、党参10 g、熟地20 g、当归10 g、白芍10 g、枸杞10 g、红花5 g、陈皮5 g、桃仁5 g、甘草5 g组成,按原方剂量的5倍购于贵阳市同济堂公司。

1.2.2 制备 将以上中药用约8倍的自来水浸泡30min,煎煮两次,每次煎煮1 h,经过滤、合并滤液并加热蒸发,制成浓度为2 g/mL的水煎溶液,分瓶置于4℃冰箱保存,用时复温。

1.3 模型建立 将模型组和实验组大鼠放置于水温(30±2)℃,水深45 Cln的水槽中进行游泳训练,每日游泳前30 min实验组按16.8 g/kg/d剂量灌服健体1号水煎液,模型组灌服等量生理盐水,每次游泳4h,每3 d按体重校正灌药剂量。正常组不作任何处理。造模3周后全部动物麻醉、处死、取材。

1.4 样本的采集和指标测定

1.4.1 一般观察 记录大鼠体重,观察实验动物毛泽、精神状况、活动、血糖等一般情况。

1.4.2 主要观察指标 正常组、模型组和实验组从股动脉取血测肌酸激酶,取肝组织、后腿肌肉组织测肝糖元、肌糖元,取肝组织作病理切片。

1.4.3 取材及测试方法 采用腹腔戊巴比妥钠麻醉,腹主动脉取血6~8 mL,抗凝送贵州省人民医院检测肌酸激酶(CK)。采血结束后取大鼠左侧下肢股四头肌和肝脏中叶,加冰生理盐水冲洗干净,用滤纸吸干,称重、甲醛固定,按试剂盒说明的蒽酮比色法测定肌糖元和肝糖元,试剂盒均由南京建成生物医学工程研究所提供。另取部分肝组织送贵阳市第一人民医院病理中心作病理切片。

1.5 数据分析 数据以(x±s)表示,采用统计软件SPSS11.5中oneway-ANOVA进行单因素方差分析,并用LSD法进行两两比较、相关性检验,P

2、结果

2.1 各组大鼠一般情况观察 结果(表1)显示,整个实验过程中实验组动物外观、行为、活动、粪便性状等均无异常症状出现,未见明显急性毒副反应。模型组2只动物因溺水捞出不及时死亡。模型组体重明显下降,实验组体重增长与模型组比较有显著差异(P

2.2 各组大鼠血清肌酸激酶、肝糖元、肌糖元的变化 结果(表2)显示,模型组血清肌酸激酶含量较正常组明显升高(P

2.3 各组大鼠肝、肾病理组织学结果

2.3.1 肉眼观察 正常组及实验组大鼠肝脏颜色深红,表面光滑,边缘锐利,质地软、脆,触之易碎,与周围组织无粘连,易分离。模型组大鼠肝脏除颜色稍浅外,与正常组及实验组比较无明显变化。

2.3.2 肝组织HE染色病理形态学观察 大鼠正常组肝组织结构清晰,肝细胞大小均匀,无变性、坏死,肝小叶结构清晰,肝小叶内肝索排列较整齐。模型组肝脏组织结构基本正常,血窦腔变狭窄,肝细胞质疏松,有弥漫性中度水样变性。实验组肝组织、肝小叶结构清晰,肝细胞大小均匀,无变性、坏死(图1-图3)。

3、讨论

古人早已认识到,疲劳指“过劳”,即劳力过度、劳神过度、房劳过度。而运动性疲劳的形成主要由于劳力过度及劳神过度。在中医的经典著作中却有许多关于“疲劳”的论述。如《素问.宣明五气篇》指出:“久视伤血,久卧伤气,久坐伤肉,久立伤骨,久行伤筋,是谓五劳所伤”。是为劳伤造成的气血、筋、骨、肉的损伤;同时,劳伤可内伤脏腑,《素问·生气通天论篇》云:“因而强力,肾气乃伤,高骨乃坏。”这是强用其力造成的肾气损伤;《素问·经脉别论》云:“持重远行,汗出于肾,疾走恐惧,汗出于肝,摇体劳苦,汗出于脾”。这是劳伤造成的肾、肝、脾脏腑功能失调;《杂病广要虚劳篇》曰:“劳动不息则形虚”,这些都阐明了疲劳的病因病机主要与精气耗损有关。

现代医家认为,运动性疲劳作为一种亚健康状态或疾病状态,主要由于劳役过度、情志不畅及痰湿瘀血所致,机体脏腑功能失调、气血阴阳不足、痰瘀阻滞是疲劳产生的主要机理。健体Ⅰ号是是遵义市名老中医王希明在30多年的临床应用中总结出来的方剂,用于长期气血两虚证为主兼痰湿瘀血阻滞所致的一系列疾病,临床疗效良好。运动性疲劳亦符合气血不足为主兼痰瘀阻滞的这一病理特点。方中黄芪性温味甘,健脾益气,缓解虚证,当为君药;当归补血活血,与黄芪相须为用,熟地滋阴补肾为臣药;白芍养阴柔肝,佐以桃仁红花活血化瘀等促进代谢产物的排泄,全方配伍,共同达到气血双补、益肾健脾和活血化瘀之功效,本方剂在临床应用中未有患者出现不适及不良反应。上述所用药物尚有提高机体免疫力、调节内分泌、抗疲劳、清除过氧化脂质等功能,可减轻过氧化物对细胞膜的损害作用。

本方主要针对体力过劳所致机体病理变化,在临床中能有效的促进疲劳恢复,是一个以补为主的中药复方,若无明显虚证及体态肥胖的患者慎用。本课题组还从该方中提取的总黄酮、总甙苷及总多糖三种成分作抗疲劳试验取得良好的效果(另文报道),说明这三种成分可能是该方的主要有效成分。在实验期间大鼠除因游泳过程中溺水死亡外未有因其它原因出现死亡的病例,配方中所用药物未见含有运动员违禁成分的相关报道。

本实验通过测定经健体Ⅰ号治疗后血糖及糖元指标,探讨健体Ⅰ号对运动性疲劳的治疗作用。糖与运动的关系极为密切。运动前体内保持充足的糖储备是决定训练质量和比赛成绩的重要因素之一。机体中糖的主要贮存形式是肌糖原,它和肝糖原一起提供运动所需要的能量。肌糖原主要功能是作为肌肉活动的基本能源物质,通过糖酵解或有氧代谢为运动提供能量。有文献资料报道肌糖元含量与运动能力有必然关系,过度训练、改变运动集训环境或强体力劳动会引起骨骼肌营养不良,并通过食品干预训练大鼠,有利于改善骨骼肌肌糖元蓄备和营养状况。而肝糖原是运动中所消耗血糖的来源,肝糖原储备的增加,就可为机体提供更多的能量以提高运动耐力达到抗疲劳的目的。本实验结果显示:模型组实验动物血糖、肝糖元、肌糖元含量较正常组明显偏低,实验组能明显提高血糖及糖元含量,说明健体Ⅰ号复方有补充机体所消耗的营养成分,增加糖元储量,维持血糖的正常水平。

肌酸激酶通常存在于动物的心脏、肌肉及脑等组织的细胞浆和线粒体中,是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶。大量研究表明,肌肉在经过高强度负荷后,肌肉酸痛与血清CK水平存在高度相关性。有研究证明无论是高强度还是低强度的训练都会促使细胞内CK释放,进入血液使血清中CK浓度升高。刘振玉认为剧烈运动后血浆CK活性显著升高的主要原因应考虑为运动时细胞膜通透性增大所致。因此,血CK已成为衡量运动性疲劳的重要指标。健体Ⅰ号以黄芪为君药,具有较好的补气效果,益气药可以维持总CK活性,并且维持CK同工酶及ANT两种异构体mRNA的表达,张彩等也报道补中益气汤对改善CK有一定的效果。本实验结果显示:模型组血清的CK含量较正常组明显升高,实验组的血清CK含量较模型组明显改善(P

杨育周等提出了健脾益肾抗疲劳的观点,认为运动性疲劳与脾、肾关系密切,与其他脏腑也有一定关系,尤其与肝关系密切。从病理组织学显示过度疲劳会导致肝脏组织细胞出现一定程度损伤,说明健体I号有保护肝细胞、减轻肝细胞损伤的形态学基础,从而发挥其抗运动性疲劳的功效。

4、结论

健体Ⅰ号能增加疲劳大鼠糖元储量,维持血糖的正常水平;并能降低疲劳大鼠的血清CK含量,保持细胞膜的完整性;对肝脏有保护作用。提示健体Ⅰ号能对抗大鼠运动性疲劳,促进大鼠运动性疲劳的恢复。这为中医药应用于抗体力性疲劳和促进体能的恢复提供一定的依据。