不同氮源对棉花炭疽病病原菌的影响研究

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摘要 研究不同氮源对棉花炭疽病病原菌的影响，结果表明：以硝酸钠为氮源培养基时产孢量最高，以蛋白胨为氮源培养基时病原菌生长速率最大。

关键词 氮源；棉花炭疽病病原菌；孢子量；生长速率

中图分类号 S435.621 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）16-0106-01

棉花是中国重要的农业经济作物，不仅涉及到农业和纺织工业两大产业，还是中国农民重要的收入来源，其同时也是我国出口的主要商品之一。另外，棉花在国防、医药、汽车工业等方面也有极其重要的用途。

棉苗病害种类很多，有40余种，广泛分布于世界各产棉区，常造成严重损失。常见的棉花病害有棉花炭疽病、立枯病等。在南方，棉花炭疽病发生较多，其病菌主要通过棉种携带传播，其次是土壤中的植物病残体。发病后，在茎基部发生红褐色梭形病斑，有时开裂。严重时病部变黑，幼苗萎蔫死亡[1-3]。为有效控制棉花炭疽病的发生危害，对其生物学特性进行研究，现将试验结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 供试菌株的准备

采集棉花的病叶和棉铃，将分离得到的病原菌转接到PDA培养基上，后将纯化的病原菌再次接种到PDA培养基，经过一段时间培养后，对其培养性状进行观察，并对所观察到的结果进行显微计测和摄影。

1.2 不同氮源对病原菌的影响

1.2.1 对生长速率的影响。基础培养基为Czapek培养基，设置6种氮源，分别为蛋白胨、硝酸钾、硝酸钠、硝酸铵、硫酸铵、磷酸氢二铵，以空白作对照（CK），3次重复。在无菌条件下将菌碟（直径为7 mm）接入到不同氮源的培养基平板上，将其置于25 ℃的恒温条件下进行培养，隔日观察菌落形态，采用十字交叉法测量菌落直径。

1.2.2 对产孢量形成的影响。不同培养基的配制同1.2.1，3次重复。病原菌接种后在恒温箱培养10 d后，用去离子水冲洗培养基上的菌丝，制成孢子悬浮液，然后观察计算孢子浓度。

1.2.3 对菌丝干重的影响。不同培养基的配制同1.2.1，然后将琼脂除去，使培养基呈液态。将配制好的液态培养基倒入组培瓶中，每瓶150 mL，然后将病菌接种至上，每个瓶中接入菌碟2块，3次重复。经过7 d后提取菌丝并称其干重。

2 结果与分析

2.1 对病原菌菌丝生长速率的影响

由表1可以看出，以蛋白胨、硝酸钾、硝酸钠、CK作为氮源的培养基菌丝生长均较快，培养6 d后菌落直径可达4.7 cm以上以硫酸铵作为氮源的培养基菌丝生长最慢，菌落直径仅1.63 cm，但在CK培养基上，菌落生长极其稀疏。

2.2 对病菌产孢量形成的影响

通过计算孢子浓度，表明炭疽菌在不同氮源培养基上的产孢量差异较大。其中，以硝酸钠的产孢量最大，达1 633.5万个/L，其次是硝酸钾、蛋白胨，其产孢子量分别达1 250.0万、716.5万个/L，硝酸铵、磷酸氢二铵和CK的产孢量较少，分别为5.00万、2.50万、5.83万个/L，硫酸铵培养基上几乎不产生分生孢子，仅为0.83万个/L。

2.3 对菌丝干重的影响

菌丝称重结果表明，炭疽菌在蛋白胨、硝酸钾、硝酸钠、硝酸铵等液体培养基中培养7 d后，以在蛋白胨上菌丝生长最好，7 d后菌丝干重可以达0.494 3 g，其次为硝酸钠、硝酸铵、磷酸氢二铵和硝酸钾，7 d后菌丝干重分别为0.477 3、0.367 1、0.358 3、0.317 9 g，硫酸铵生长量一般，7 d后菌丝干重为0.203 6 g，CK生长最差，仅为0.123 3 g。

3 结论与讨论

试验结果表明，棉花炭疽病病原菌对供试的6种氮源利用存在差异，病菌在蛋白胨、空白对照中生长较好，其次为硝酸钾和硝酸钠，在硫酸铵中生长速率最小，其余的生长速率一般；病原菌在硝酸钠和硝酸钾中产孢量最大，其次为蛋白胨，硝酸铵和空白对照位居第三，硫酸氢二铵较低，硫酸铵最低；液体培养基中，病菌在蛋白胨和硝酸钠中生长最好，其次是硝酸铵和硫酸氢二铵，空白对照最差，其余的一般。总体来说，不论是固体培养基还是液体培养基，生长速率、产孢量还是菌丝干重，炭疽菌对氮源中唯一的有机氮即蛋白胨利用效果最好，硫酸铵最差[4-6]。

4 参考文献

[1] 潘月敏，郭敏，高智谋，等.安徽省棉花红腐病菌生物学特性研究[J].植物病理学报，2005，35（S1）：113-115.

[2] 周传清.棉花铃期病害与综合防治措施[J].农技服务，2008，25（7）：53-55.

[3] 赵鸣，夏晓明，马惠，等.2008年山东省棉花主要病害的调查及防治措施[J].山东农业科学，2009（3）：99-102.

[4] 潘月敏. 棉花红腐病菌生理生化及有效复配剂筛选研究[D].合肥：安徽农业大学，2005.

[5] 陆宁海，徐瑞富，吴利民，等.棉花红腐病病原菌生物学特性的研究[J].棉花学报，2005（2）：84-87.

[6] 杨荣明.棉花铃病发生特点及防治方法[J].农家致富，2011（16）：36-37.