免疫组化中用15%乙醇处理切片后的观察

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【摘要】　目的　应用15dul.html" target="_blank">免疫组化技术探讨肿瘤的诊断和鉴别诊断。方法　将蜡块切好片，用15%乙醇处理后做免疫组化染色。结果　背景白色或浅黄色与棕褐色的颗粒形成鲜明对比。结论　在医学的基础和临床研究中发挥着重要的作用。

免疫组化技术，在现代生物学领域中广泛应用，在医学的基础和临床研究中发挥着重要的作用，为疾病尤其是肿瘤的诊断、鉴别诊断提供了强有力的手段。为了使颗粒清楚、背景不加深，经实验应用蜡块切好片，用15%乙醇处理，做免疫组化染色，细胞核和细胞浆的背景着色明显减轻，颗粒清晰，更易计数，取得较好的效果。

1　材料和方法

1.1　取材　取乳腺标本，将组织切成1.5 cm×1.5 cm×0.2 cm大小，中尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋。

1.2　切片　连续切片3 μm厚，并做常规免疫组化染色和切片后用15%乙醇处理后的免疫组化染色。

1.3　免疫组化染色　将切片放入有盖的15%乙醇塑料容器内漂洗数分钟后，迅速放入水浴缸内展平处理，结束后于60 ℃烤箱4 h。切片常规脱蜡至水，按免疫组化染色常规步骤进行DAB显色，水洗，迅速常规脱水，透明、封片。

2　结果

2.1　图1　常规免疫组化染色：背景呈棕色，颗粒呈棕褐色 ×40作者单位：430085　湖北武钢二医院病理室(张丽　徐毅　吴爱军　刘树刚　袁伟)；湖北武钢二医院外科(陈首虹　罗力　纪光伟)

2.2　用15%乙醇处理切片后的免疫组化染色观察　背景白色或浅黄色与棕褐色的颗粒形成鲜明对比，易于肿瘤的诊断和鉴别诊断(如图2)。

3　讨论

3.1　用15%乙醇处理切片后的免疫组化染色，是因为醇分子中的氢氧键高度极化的缘故。羟基上带有部分正电荷的氢可以和另一分子中带部分负电荷的氧相互吸引而形成氢键，因此液体状态的醇通过氢键发生缔合［1］。从组织细胞水平进行抗原抗体反应［2］。结果，背景清晰，棕褐色颗粒与背景反差增大。

3.2　在染色过程中应注意：①DAB显色时间要短，不超过3 min即可；②15%乙醇容器要加盖，以免挥发；③对比染色应为清楚地显示阳性成分与进行HE染色等。此种方法：重复性好，结果稳定，具有可行性和实用价值。

参考文献

1　承德医学专科学校.医用化学.人民卫生出版社，1980：140.

2　纪小成,施作霖.诊断免疫组织化学.军事医学科学出版社，1997：4.

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