尿沉渣实验室检查的方法、注意事项和临床意义
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1尿沉渣实验室检查方法
1.1直接镜检法将尿液充分混匀,取其中1滴尿直接涂于载玻片上,依据各种有形成分的形态特点,用显微镜观察作出报告。
1.2玻片画框法用标定好的滴管加混匀尿2滴涂满蜡笔画好的25.2mm×25.2mm框内,静止3min后累计20个高倍视野细胞数,结果以每微升细胞数报告。细胞数(μL)=T×A/20BV。式中T=细胞累计数,20=所观察的视野数,A=标本分布面积,B=高倍视野面积=π高倍视野半径2,V=标本用量(μL)。
1.3自然沉降法将尿液在室温下放置15～30min后,移去上层的尿液,保留底层大约0.2mL左右,然后混匀,取其中1滴沉淀于载玻片上,镜检同直接镜检法。
1.4离心沉淀法尿液10mL离心5min,相对离心力为400g离心5min,弃上清留沉渣尿量0.2mL,混匀后吸取20μL,滴在玻片上,用18mm×18mm盖片覆盖,先用10×10低倍镜观察全片,再用10×40高倍镜仔细观察,检查细胞至少10个视野,检查管型至少20个低倍视野,报告以高倍视野所见最低至最高数字表示。
1.5尿沉渣定量计数板法取一定量(10mL)尿液置特制的离心管内,在规定离心时间和转速的条件下离心沉淀,移去上清尿液,保留一定量的尿沉淀物,取1滴滴入计数板内,在显微镜下计数,然后换算成一定体积(1/μL)内尿有形成分的含量。
正常人尿沉渣中可见少量红细胞、白细胞、上皮细胞、结晶、黏液丝等,但罕见透明管型。尿异形红细胞常表明与肾性疾病有关,而正常形态红细胞主要见于非肾性疾病。尿白细胞中闪光细胞超过10%多考虑肾盂肾炎,管型是肾损害及损害程度的证据。根据管型的横径大小可将管型分为狭管型(为1～2个红细胞直径宽),中等宽度管型(3～4个红细胞直径宽),宽管型(5个红细胞直径宽)。宽管型提示肾功能严重受损,预后不佳。
2尿沉渣显微镜检查注意事项
2.1标本问题尿沉渣镜检通常推荐采用晨尿,原因是晨尿最浓缩、能最大限度地反映有形成分的情况。有学者提出采用晨间第2次尿液,即留取早上8～9点钟尿液,避免因标本室温存放时间过长(尿液放置过久变碱性)、细菌生长、蛋白分解、氨升高而使细胞、管型等有形成分破坏影响检查结果。采集标本后应在1h之内完成检查,否则可将标本加甲醛并置4℃保存。
2.2染色问题染色时间要恰当,染色时间过久可引起淡染细胞向浓染细胞转化,有碍识别。甲苯胺蓝染色有助于细胞、管型的鉴别,易于观察管型及细胞核的结构,防止漏检;苏丹Ⅲ染色易于识别脂肪变性细胞、脂肪管型等,巴氏染色易于识别各种上皮细胞,但操作复杂,过氧化物酶染色易于区别粒细胞及上皮细胞管型。有的认为尿沉渣检查不必染色,因为有些染液会引起溶血,或因大量染液而稀释标本。
2.3显微镜检查和结果报告问题显微镜检查应在较弱光线下进行,这样比较容易观察管型(如透明管型)和异形红细胞,所有的显微镜检验结果必须和理化检验结果符合,若存在不一致的结果,应进行复核。镜下发现红细胞,应进一步作形态分类,以鉴别肾小球性及非肾小球性血尿。计数时要注意有无其他异常巨大细胞、寄生虫虫卵、细菌、滴虫、粘液丝等,男性标本还要注意有无及卵磷脂小体等。
3显微镜检查的临床意义
尿液显微镜检查有形成分,可以发现红细胞、白细胞、管型、结晶等。红细胞增多指示尿路出血,红细胞形态有助于确定出血来自肾小球或下尿路。白细胞或脓细胞增多提示尿路感染。管型增多提示肾小球肾炎、肾功能减退。结晶的特殊形态可以帮助确定胱氨酸尿、高尿酸症、药物结晶等。
3.1镜下血尿见于泌尿系统的炎症、肿瘤、结石性等疾病。如以形态异常的红细胞为主,提示肾性疾病;但也见于全身性疾病,如特发性血小板减少性紫癜、血友病、再生障碍性贫血、系统性红斑狼疮等,以及泌尿系统邻近器官的疾病,如前列腺炎、盆腔炎等。摄入别瞟醇、抗凝剂、环磷酰胺、青霉素、磺胺类药等药物也可有红细胞增多。
3.2镜下脓尿主要见于泌尿系统的感染,主要见于泌尿系统的感染,尤其是急性肾盂肾炎、泌尿道结石、膀胱炎等;也可见于泌尿系统临近器官疾病,如前列腺炎、阴道炎、盆腔炎等。
3.3上皮细胞肾实质损害时,肾实质损害时,如肾小球肾炎,可见较多的肾小管上皮细胞;泌尿系统炎症时,可见较多鳞状上皮细胞、移行上皮细胞。
3.4管型出现管型表示肾实质损害,见于急性或慢性肾小球肾炎、肾功能衰竭等。出现红细胞管型,特别有助于证明肾性出血。出现白细胞管型,特别有助于肾盂肾炎与膀胱炎鉴别,后者为阴性。颗粒管型、蜡样管型的出现进一步表明肾疾病的恶化或进入晚期。脂肪管型多见于肾病综合征、慢性肾炎等。
3.5结晶生理性结晶常见的有草酸钙、尿酸、磷酸铵镁结晶。病理性结晶主要有胱氨酸结晶、亮氨酸结晶、酪氨酸结晶、胆固醇结晶、放射造影剂结晶、磺胺类药物结晶、阿司匹林结晶、磺基水杨酸结晶等。