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鲜姜汁对大肠杆菌及巨大芽孢杆菌的抑制作用研究

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摘要:将新鲜生姜研磨过滤获得100%鲜姜汁,稀释成75%、50%、25% 3个梯度浓度,以无菌水作为对照,以大肠杆菌(Escherichia coli)、巨大芽孢杆菌(Bacillus magaterium)为试验菌,采用滤纸贴片法测定抑菌作用,比较不同浓度姜汁的抑菌活性。结果表明,随着姜汁浓度的增大,抑菌作用增强。

关键词:姜汁;抑制作用;大肠杆菌;巨大芽孢杆菌

中图分类号:R285,TS264 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2013)06-1315-02

生姜是姜属植物姜(Zinggiber ofcinale Rosc)的根茎。姜是热带、亚热带地区的一种重要栽培植物,在中国的中部、东南部、西南部广为栽培。生姜作为药食两用的植物在中国具有悠久的种植和食用的历史。在中医药用性能上,生姜味辛、性温,有开胃止呕、化痰止咳、发热解汗等作用,适用于外感风寒、咳嗽、胃寒呕吐或吐清水,也可用于增进血行、驱散寒气、益胃气、助发汗。生姜中含有挥发性油,主要成分有姜醇、姜烯、甲基庚烯酮、姜辣素等[1]。医学研究表明生姜对细菌有抑制作用,对阴道滴虫有杀灭作用;有明显的抗溃疡、抗菌、治疗心脏血管疾病等药用保健功能[2,3]。其所含成分被证明有降血脂等功能[8,9]。生姜是一种天然的抗氧化剂,具有较好的保鲜作用,对食品工业和人体健康具有重要意义[4]。生姜在食品工业中作为抗氧化剂及防腐剂添加[5-7]。

现代科学研究证实,生姜有消炎抗菌的作用。生姜的水浸剂对伤寒杆菌、链球菌、沙门氏菌、肺炎球菌有明显的抑制作用,可用于治疗痢疾和腹泻。鲜姜汁对大肠杆菌、啤酒酵母、青霉菌有较明显的抑菌作用。付爱华等[10]报道,生姜提取物用液态沙堡琼脂培养基稀释为0.062 5%~0.250 0%对培养基中的皮肤癣菌、红色毛癣菌、犬小孢子菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌有极为显著的抑菌、杀菌作用。陈碰玉等[11]研究发现,新鲜生姜对幽门螺杆菌具有较好的抑菌作用。

试验以人体肠道常见微生物大肠杆菌(Escherichia coli)和巨大芽孢杆菌(Bacillus magaterium)为材料,利用滤纸片法测定抑菌圈,明确姜汁的抑菌作用,为生姜的开发利用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.1.1 生物材料 生姜:鲜品,购买于超市;供试菌种:大肠杆菌、巨大芽孢杆菌菌种均为商丘师范学院生命科学学院微生物学实验室提供。

1.1.2 仪器 电磁炉、电子天平、高压蒸汽灭菌锅、电热恒温培养箱、超净工作台等。

1.2 试验方法

1.2.1 姜汁的制备 将姜洗净,晾干,放在紫外灯下照射20 min消毒[12]后放入无菌的研钵,在无菌操作台上加入少许石英砂研磨,用4层纱布过滤得到鲜姜汁,定这时浓度为100%,用无菌水稀释(V/V)到75%、50%、25%,即得到4个浓度的姜汁。

1.2.2 培养基的制备 称取牛肉膏5 g、蛋白胨10 g、氯化钠5 g、琼脂20 g,量取1 000 mL蒸馏水,混合加热至完全溶解,调节pH至7.0~7.4后分装于250 mL三角瓶中,同时制试管斜面,灭菌[13]。

1.2.3 菌种的活化 将大肠杆菌和巨大芽孢杆菌按照无菌操作规程分别接入试管斜面, 37 ℃恒温培养箱中培养24 h。

1.2.4 菌悬液的制备 用接种环挑取一定量的活化后的大肠杆菌和巨大芽孢杆菌菌苔,放入装有10 mL无菌水的试管中,振荡5 min,使菌体充分散开,制成2种菌的菌悬液。

1.2.5 抑菌试验 采用滤纸片法[14],取直径6 mm的灭菌滤纸片放入各浓度的姜汁中浸泡30 min,对照滤纸片用无菌水浸泡。将待试菌悬液各1 mL加于平板培养基后用无菌涂布棒涂布均匀制成含菌平板,平板静置30 min后用无菌镊子把滤纸片贴在含菌平板上,每个平板放4片同种滤纸片,每个浓度4个重复,每组1个对照。平板于37 ℃恒温培养箱中倒置培养48 h,取出测定并记录抑菌圈直径,比较不同浓度姜汁的抑菌效果。

2 结果与分析

抑菌圈测量结果见表1、表2。由表1、表2可见,姜汁浓度越大,抑菌效果越强,抑菌圈直径越大。空白对照均未出现抑菌圈,说明滤纸片对两种受试菌均无抑菌活性。

3 小结与讨论

实验以大肠杆菌和巨大芽孢杆菌作为受试菌种,研究鲜姜汁的抑菌活性,证明姜汁对2种细菌具有明显的抑菌作用,与郑俏然等[15]用乙醇提取法进行的试验结果相比较,抑菌圈直径明显较小,可能是由于多种因素影响导致结果的不同。生姜中挥发油的化学提取工艺有索氏法、超临界CO2流体萃取法、水蒸气蒸馏法、共水回流冷凝法等[16]。本试验采用的是鲜姜直接研磨提取,并且未进行浓缩处理,结果的差异可能是由于提取工艺的差别造成的。鲜姜汁对巨大芽孢杆菌的抑菌研究尚未有相关的报道,本试验证明鲜姜汁对巨大芽孢杆菌有抑菌作用。

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