脊髓损伤后大鼠甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的达及甲基强的松龙干预后的变化
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【摘要】 目的：研究大剂量甲基强的松龙对脊髓损伤后甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶（glycylproline dipeptidyl aminopeptidase，GPDA）基因表达变化的影响。方法：Sprague-Dawley大鼠36只。将所有大鼠随机分为三组，假手术组、脊髓损伤未使用药物干预组（创伤组）、脊髓损伤+甲强龙干预组（甲强龙组）。在大鼠脊髓损伤后24 h将损伤的脊髓组织切取，进行逆转录PCR反应并检测GDPA的表达。结果：假手术组GDPA的mRNA的表达的相对丰度为1.5403±0.1604；脊髓损伤24 h后创伤组GDPA的表达的相对丰度为0.5994±0.3414，与假手术组相比差异有非常显著统计学意义（P
【关键词】 脊髓损伤； 甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶； 甲基强的松龙； RT-PCR
Effect of High Dose Methylprednisolone on Glycyl Proline Dipeptidyl Aminopeptidase mRNA Expression after Spinal Cord Injury/LUO Fen-qi，XU Jie.//Medical Innovation of China，2012，9（31）：004-005
【Abstract】 Objective：To investigate effect of high dose methylprednisolone （MP） on Glycyl Proline Dipeptidyl Aminopeptidase mRNA expression after spinal cord injury mRNA expression after spinal cord injury.Method：Thirty SD rats were divided equally into operation but none injury group， Allen’s weight drop injury group and injury with high dose MP group. Twenty four hours after the operation， the spinal lesion and neighbor areas were moved for examination of Glycyl Proline Dipeptidyl Aminopeptidase mRNA expression by Retrograde Polymerase Chain Reaction technique （RT-PCR）.Result：The Glycyl Proline Dipeptidyl Aminopeptidase mRNA expression were 1.5403±0.1604， 0.5994±0.3414 （P
【Key words】 Spinal cord injury； Glycyl proline dipeptidyl aminopeptidase； Methylprednisolone； RT-PCR
First-author’s address：Fujian Provincial Hospital，Fuzhou 350001，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.31.002
脊髓损伤后，神经细胞增生肥大，胞浆呈嗜酸性，突起变粗，分支增多。这些改变可起到减轻损伤及填补组织损伤而形成的空洞等作用，为神经再生创造条件；但聚集的星形胶质细胞所形成的胶质性瘢痕及其所分泌和表达的抑制性因子形成机械及化学屏障对上下行神经元轴突的再生有明显的阻碍作用[1]。N2末端为甘氨酰2脯氨酰的肽键能被GDPA特异地水解，而该肽键正是构成胶质的基本结构[2]，因此，推测GPDA在缓解星形胶质细胞所构成的机械和化学屏障中起到作用，从而改善脊髓继发性损伤的进一步发展。本文对GDPA基因在多种情况下表达的变化进行研究，并探讨脊髓损伤早期，GDPA对继发性脊髓损伤的影响，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 动物及分组 Sprague-Dawley大鼠（中科院上海实验动物中心提供，10周龄）36只，体重180～240g。根据随机表分为三组。假手术组、脊髓损伤未使用药物干预组（创伤组）、脊髓损伤+甲强龙干预组 （甲强龙组）。每组12只。在大鼠脊髓损伤后24 h将损伤的脊髓组织切取，进行逆转录PCR反应。检测GDPA的表达。
1.2 手术方法 腹部消毒后腹腔内注射戊巴比妥钠30 mg/kg麻醉，腰背部备皮消毒，充分暴露T8～9脊髓腰膨大。采用改良的Allen打击法（5 g×5 cm）制作脊髓损伤模型，甲强龙组大鼠静脉注射甲基强的松龙（30 mg/kg），假手术组未做任何处理关闭切口，创伤组大鼠静脉内注射等量的0.9%氯化钠溶液。24 h后切除脊髓损伤部位上下1 cm的脊髓组织切取，进行RT-PCR反应。