从蜂王浆中提取蜂王酸的研究
开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇从蜂王浆中提取蜂王酸的研究范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！
摘要：目的探讨从蜂王浆中提取蜂王酸（10-HAD）的工艺。方法二次有机溶剂提取，二次调pH，用高效液相色谱法对10-HDA进行定性分析。结果蜂王浆中10-HDA的最佳提取条件为：蜂王浆水溶液pH 10，加入乙醚提取杂质，再调pH 2加入乙醚提取10-HDA。结论此法可从蜂王浆中高效提取10-HDA。
关键词：蜂王浆；蜂王酸；提取；高效液相色谱法；测定
中图分类号：S896.3 文献标识码：A 文章编号：1672-979X(2008)03-0030-03
Extraction Study on 10-HDA from Royal jelly
WANG Wen-feng1, XU Ling1, WANG Teng-fei1, MEI Ying-jie2, WANG Rui-ming1*
(1.Shandong Institute of Light Industry, Jinan 250353, China; 2. Zibo Institute of Product Quality Supervision & Inspection , Zibo 255000, China)
Abstract：Objective To discuss the technique of extraction of 10-HDA from royal jelly. Methods The HPLC was used for the qualitative analysis of 10-HDA with two organic solvents used and pH adjusted twice. ResultsThe best extraction condition of 10-HDA from the royal jelly was as follows: first adjusting the pH of the solution to 10, then adding ether for the extraction of impurity; secondly adjusting the pH to 2, then adding ether for the extraction of 10-HDA . Conclusion This method can be used for the high effective extraction of 10-HAD from royal jelly.
Key words：royal jelly; 10-hydroxy-2-decenoic acid; extract; high pressure liquid chromatography; determination
蜂王酸（10-HAD，又称王浆酸），自然界只有蜂王浆中含有，是蜂王浆中重要的不饱和脂肪酸，有提高机体免疫力[1]、抑制多种癌细胞[2]，治疗急性辐射损伤[3]和化学物质所致损伤[4]等多种生理活性。国内不少厂家已开始研究10-HDA的提取。目前生产10-HDA主要有两条基本途径：物理提取法[5]和化学合成法[6]。化学合成路线或工艺大多流程太长，或产率过低，或合成条件苛刻，目前无工业生产价值。我们初步探讨了从蜂王浆中提取10-HDA的工艺流程，以为提取10-HDA提供数据。
1材料
1.1试剂
蜂王浆（养蜂场野生蜂王浆）；无水乙醚（天津巴斯夫化工有限公司）；无水乙醇（天津化学试剂三厂）。
1.2仪器
电子分析天平；电热恒温干燥箱；离心机；全温振荡器；旋转蒸发仪。
2方法
2.1单因素试验
2.1.1确定蜂王浆水溶液pH（Ⅰ）[7]称取5份蜂王浆各5 g置于250 mL三角瓶中，加入50 mL水溶解，置200 r/min摇床中震荡10 min。用6 mol/L NaOH调溶液pH（Ⅰ）为8.0，9.0，10.0，11.0，12.0。震荡摇匀后，加入50 mL乙醚（Ⅰ）置200 r/min摇床震荡10 min提取杂质，置分液漏斗中静置3～4 h。取下层水液（乙醚层用旋转蒸发仪回收）用1:1盐酸调pH（Ⅱ）至2.0，摇匀，加入50 mL乙醚（Ⅱ）置200 r/min摇床摇匀，静置过夜，充分提取10-HDA。用旋转蒸发仪回收乙醚得10-HDA浓缩液，加入5～10 mL乙醇溶解，滤纸过滤，去除不溶于乙醇的杂质，置于平皿内晾干即得10-HDA粗提产品。见图1。
由图1可见，pH（Ⅰ）10以上时，平均提取率达到较高的水平。10-HDA是一种单不饱和脂肪酸，在pH 10左右的溶液中以盐的形式存在，这时可用乙醚除去蜂王浆中的脂溶性杂质。
2.1.2确定乙醚（Ⅰ）加入量其他提取条件不变，乙醚（Ⅰ）加入量分别为30，40，50，60，70 mL。结果见图2。
由图2可见，加入乙醚超过50 mL时，平均提取率几乎不变，故选取乙醚（Ⅰ）的最佳加入量为50 mL。
2.1.3确定蜂王浆水溶液pH（Ⅱ）其他提取条件不变，用1:1盐酸调pH（Ⅱ）为1.0，2.0，3.0，4.0，5.0。结果见图3。
由图3可见，pH（Ⅱ）为2.0时，提取率最高。因此，选取2.0为最佳pH（Ⅱ）值。
2.1.4确定乙醚（Ⅱ）加入量其他提取条件不变，乙醚（Ⅱ）加入量分别调整为30，40，50，60，70 mL，结果见图4。
2.2正交试验
根据以上单因素实验的结果，拟定4因素5水平正交试验，实验步骤同上，数据见表1。
3结果与讨论
3.110-HDA的提取效果
用高效液相色谱法[8]在适宜条件下分析10-HDA的标准品和提取的粗产品，结果见图5。
3.2提取10-HDA最佳参数的确定
提取10-HDA的最佳参数为A3B3C2D4（见表1）。即调pH 10，用50 mL乙醚提取杂质；再调pH 2.0，60 mL乙醚提取10-HDA（综合考虑提取率和原料成本，乙醚（Ⅱ）的加入量改为50 mL）。
4结语
10-HDA具有多种生理活性，尤其是有抗癌功能，是一种天然的绿色保健品，将越来越受到关注。目前化学合成法尚不具有工业生产价值，因此，用有机溶剂提取10-HDA的方法具有不可取代的优势，它操作简单，耗费低廉，省时省力，提取效果较好。本实验用乙醚、乙醇两种溶剂提取，效果较好，最高浓度可达87 %。两种溶剂价格低廉，乙醚的沸点较低，便于回收，达到了工业生产的要求，因而适于推广使用。不足之处是在提取过程中，蜂王浆中的其他活性成分如小分子氨基酸、维生素等未能合理利用，造成部分资源浪费。
参考文献
[1]王文风，徐玲，王瑞明，等. 10-HDA的研究与应用[J]. 食品科技，2007，32（5）：270-273.
[2]王腾飞，王瑞明，刘洪玲，等. 发酵液中10-HDA的药理保健作用及分析确定[J]. 四川食品与发酵，2006，42（1）：56-58.
[3]汪多仁. 王浆酸的开发与应用进展[J]. 养蜂科技，2004.（4）：6-10.
[4]杨晓林. 人参总甙及蜂王浆抗化学物质所致DNA损伤作用初探[J]. 北京医科大学学报，2002，22（1）：75-76.
[5]王龙杰, 卢泽勤. 蜂王酸的应用及制备[J]. 广西化工，2001，25（1）：38-42.
[6]Kulkarni S M. A short synthesis of royal jelly acid[10-hydroxy-(E)-2-decenoic达式acid] [J]. Indian J Chem, Sect.B23B(5), 2004：460.
[7]王腾飞，王海燕，刘洪玲，等. 发酵液中提取10-HDA的研究[J]. 酿酒科技，2006，（1）：27-29.
[8]倪辉，杨远帆，彭莺. 蜂王浆中10-HDA的研究进展[J]. 中国蜂业，2006，57（3）：9-10.