讨论咽拭子标本对手足口病疫情监测的应用

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【摘要】 目的 观察讨论咽拭子标本对手足口病疫情的监测方法及效果，总结其临床应用价值。 方法 选取我中心2009年9月至2013年9月收集的164例手足口病患者的咽拭子标本，分别对其进行病毒RNA提取，以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测柯萨奇病毒16型（CoxA16）、肠道病毒71（EV71）型的特异性引物和肠道通用引物。 结果 164例标本中，检测出肠道通用引物为扩增阳性有90例，占54.9%，其中检出CoxA16阳性有83例，占50.6%，EV71阳性有20例，占12.2%。 结论 手足口病的疫情监测显示以EV71和CoxA16两种类型病毒为主要病原，使用咽拭子标本进行手足口病疫情监测，操作简便，出结果快，检出率高，具有重要的临床应用价值。

【关键词】 咽拭子标本；手足口病；疫情监测

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.03.724 文章编号：1004-7484（2014）-03-1760-02

手足口病是由肠道病毒所引起的感染性疾病，在临床上以手、足、口腔多处同时出现皮疹、疱疹为主要症状的临床症候群，患者一般症状较轻，但也有部分患者出现呼吸系统、中枢神经系统损害等较严重病情，个别患儿病情危重且进展迅速，如不能及时处理可导致死亡[1]。该病可由20多种肠道病毒感染引起，具有传播性，可引起相关疫情的发生，因此需要通过对该病的疫情进行监测，以便及时实施公共卫生管理措施阻止疫情的扩散。通过观察咽拭子标本对该病的临床检测效果，研究其在该病疫情监测中的作用，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取我中心2009年9月至2013年9月收集的164例手足口病患者的咽拭子标本，标本来源病例拟诊断为手足口病，年龄1岁-9岁，且采集时距疱疹出现未超过5d，采集前及发病前近期为使用抗病毒药物治疗。

1.2 方法 对入组标本进行振荡混匀，离心3000转20分钟。使用RNA提取液200μl进行病毒RNA提取，以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测柯萨奇病毒16型（CoxA16）、肠道病毒71（EV71）型的特异性引物和肠道通用引物。CoxA16特异性引物包括CoxA16-S与CoxA16-A，EV71特异性引物包括EV71-S与EV71-A[2]。

1.3 数据处理 对两组患者数据应用SPSS软件17.0版实施统计学检验。计量资料表示为χ ±s，使用t检验；计数资料表示为n（%），使用χ2检验。可信区间95%，检验水准为0.05，P0.05表明样本数据差异明显且具有统计学意义。

2 结 果

164例标本中，检测出肠道通用引物扩增基因片段呈阳性有90例，占54.9%，其中检出CoxA16引物扩增呈阳性有83例，占50.6%，EV71引物扩增呈阳性有20例，占12.2%，见表1。

3 讨 论

以往对于肠道病毒检测多采取传统细胞培养与血清中和试验联合应用，但由于肠道病毒具有较多的血清型，在检测中常会遇到型别难以鉴定等情况，且进行细胞培养及中和试验需要较长的时间，无法满足快速诊断的临床需求，其临床应用效果与可行性较差。

而使用咽拭子标本对肠道病毒的通用引物进行筛查，能够迅速得出肠道病毒感染的判断，而后对通用引物呈现阳性病毒标本再次进行CoxA16与EV71等相关特异性引物的检验，能够明显提高检验效率，使临床检测时间显著缩短。同时这些特异性引物经相关学者的临床验证在检测中具有良好敏感性及特异性，其检测结果准确性较高[3]。

咽拭子标本在临床采集中操作简单，方便易行，不会给患儿造成较大身体不适而容易得到其配合，具有较理想的可行性，能够快速、大范围的得到样本标本，而形成对疫情监测的作用；同时手足口病的病毒最早感染位置便在咽部，在这里采样可以在最早的时间里收集病毒样本，以便快速对患儿作出诊断。相关研究表明，咽拭子标本与疱液、粪便中采集的标本在进行病毒分离、PCR检测方面没有明显差异，均能够良好的检测病毒感染状况[4]。

本文结果显示，在此次采集入组的164例标本中，通过RT-PCR检测出肠道通用引物为扩增阳性有90例，占54.9%，其中检出CoxA16阳性有83例，占50.6%，EV71阳性有20例，占12.2%。

本文所采集标本中仍有74例检测肠道通用引物呈阴性，这些标本的出现可能包括以下原因：临床上误将其他疾病诊断为手足口病而实施相应实验室检查；标本采集未达到标准要求或病毒太少等导致未采集到相应病毒；标本采集后存储、运输等环节出现问题，导致病毒的核酸出现降解；检测中出现PCR漏检、为假阴性。

本文所进行手足口病的疫情监测显示本区域内手足口病以EV71和CoxA16两种类型病毒为主要病原，使用咽拭子标本进行手足口病疫情监测，操作简便，患儿配合度较高，方便大规模临床应用，且出结果快，检出率高，具有良好的应用效果及重要的临床应用价值。

参考文献

[1] 刘凤仁，刘渠，李刚，等.2010――2012年龙岗区手足口病标本病原学检测结果分析[J].实用预防医学，2013，20（3）：359-361.

[2] 汪照国，刘晓琳，于萍，等.咽拭子标本对手足口病疫情监测的应用研究[J].预防医学论坛，2008，14（8）：761-763.

[3] 孙文军，陆武，黄文光，等.2009――2011年无锡市滨湖区托幼机构手足口病流行特征[J].社区医学杂志，2012，10（21）：50-51.

[4] 薛黎坚，王文明，王华，等.昆山市2010――2011年手足口病肠道病毒监测及流行特征研究[J].社区医学杂志，2012，10（10）：1-2.