葡萄籽提取物抗氧化功能的实验研究
开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇葡萄籽提取物抗氧化功能的实验研究范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！
摘要：目的研究葡萄籽提取物的抗氧化功能。方法以SPF级雄性昆明种小鼠为实验动物，根据小鼠体重随机分为5组，每组10只，分别是空白组、模型组和低、中、高3个剂量组，空白组和模型组每天经口给予溶剂植物油，剂量组每天经口给予葡萄籽提取物，连续灌胃30 d，取血测抗氧化酶活性。此后除空白对照外，各组射线全身一次性照射5~8 Gy 60Coγ，照射后第4天处死动物，取肝组织测过氧脂质含量和抗氧化酶活性，比较各剂量组与模型组的差别。结果经口给予小鼠葡萄籽提取物30 d，高、中剂量组小鼠血中超氧化物歧化酶（SOD）活性，以及高剂量组小鼠血中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和肝组织中GSH-Px、SOD活性均明显高于模型组，各剂量组小鼠肝中丙二醛（MDA）水平均明显低于模型组。结论葡萄籽提取物有降脂质过氧化的作用，有抗氧化功能。
关键词：葡萄籽提取物；抗氧化剂；原花青素
中图分类号：R282.71文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)11-0016-03
Empirical Study on Anti-oxidative Effect of Grape Seed Extract
FENG Dian-juan, XU Gui-fa
(Institute of Nutrition and Food Hygiene, School of Public Health, Shandong University, Jinan 250012，China)
Abstract：Objective To study the anti-oxidative effect of grape seed extract. Methods Fifty mice were randomly divided into five groups of normal control , model control and low, moderate, high dose groups. In normal control and model control groups, corn oil was given orally. In low, moderate, high dose groups, grape seed extract was given orally. After 30 days, the activities of GSH-Px , SOD in blood were measured. Then, all the groups except normal control group received one-time 5~8Gy60C0 γ ray for the whole bodies. At the fourth day after radiation, all the mice were killed and the activities of GSH-Px, SOD in hepatic tissues were measured. The difference among all groups was compared. Results After 30 days, SOD activity in blood in moderate and high dose groups, and the activities of GSH-Px in blood and GSH-Px, SOD in hepatic tissues in high dose group were higher than that in model control group. The level of malonaldehyde (MDA) in hepatic tissues in all dose groups was lower than that in model control group. Conclusion Grape seed extract can inhibit the lipid peroxidation and have an anti-oxidative effect.
Key words：grape seed extract; antioxidant; procyanidine
现代医学证明，多种疾病的发生发展与氧化损伤有关[1]。适当补充抗氧化剂对提高机体抗氧化能力，增进身体健康有重要意义。20世纪50年代以来，人们从葡萄果实、叶和其它部位分离、鉴定出的成分达100多种，发现有些成分具有生物活性，显示出抗氧化、抗高脂血症、抗疲劳和抗肿瘤等多种作用[2]。其中葡多酚（GPC），国外多称原花青素，是存在于葡萄中的天然植物多酚，在葡萄籽中含量最丰富，是葡萄籽提取物的主要成分。国外报道，葡多酚在体外具有清除自由基及抗脂质过氧化[3]等活性。研究表明[4]，原花青素还可以增强超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽-S-转移酶等的活性，对氧化损伤有良好的防护作用。我们进行了葡萄籽提取物抗氧化功能的实验研究，为进一步将葡萄籽提取物开发成保健品或药品提供依据。
1材料和方法
1.1样品
葡萄籽提取物为暗红色糕状物，主要功能成分是GPC，纯度约为90 %。
1.2实验动物
18~22 g SPF级健康成年雄性昆明小鼠50只，由山东大学动物实验中心提供。
1.3主要仪器与试剂
722型分光光度计（上海第三分析仪器厂），TGL-16G台式高速冷冻离心机（上海安亭科学仪器厂），水浴锅（北京西城区医疗器械厂）；微量加样器（德国Eppendorf公司）等。
冰醋酸，95 %乙醇，氯仿，磷酸盐缓冲液等；SOD试剂盒，丙二醛（MDA）测定试剂盒，谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）试剂盒（南京建成生物工程研究所）。
1.4实验方法
1.4.1动物分组和处理根据小鼠体重，随机分为5组，每组10只，分别是空白对照组，模型对照组，低、中和高剂量实验组。给予3个剂量组的受试动物葡萄籽提取物，按相当于人体推荐量的5，10和30倍的剂量灌胃，即分别为0.083，0.167，0.500 g/kg BW，空白和模型对照组灌服等量的植物油。连续灌胃30 d后，取血测抗氧化酶活性。此后，除空白对照外，各组全身一次性照射5~8 Gy 60Co γ射线，照射后第4天处死动物，取肝组织测过氧脂质含量和抗氧化酶活性。
1.4.2指标测定用经肝素处理过的毛细管在小鼠内眦取血，用于测定GSH-Px和SOD。照射后第4天，脱臼处死动物，取肝脏用冰冷生理盐水洗2次，用滤纸吸干后用病理刀切下0.1 g，加入0.2 mol/L磷酸盐缓冲液超速匀浆器20 000 r/min匀浆10 s，间歇30 s，重复3次，制成5 %匀浆，用于测定肝组织SOD，GSH-Px和MDA。
SOD用羟胺法测定；GSH-Px用5,5'-二硫对硝基苯甲酸（DTNB）法测定；MDA用硫代巴比妥酸比色（TBA）法测定。
2结果
2.1葡萄籽提取物对小鼠血中SOD、GSH-Px活性影响
由表1可见，与模型对照组相比，经口给予葡萄籽提取物30 d后，高剂量组小鼠血中GSH-Px活性显著高于模型组（P
2.2葡萄籽提取物对小鼠肝组织中MDA含量及SOD，GSP-Px活性的影响。
由表2可见，经口给予小鼠葡萄籽提取物30 d，与模型对照组相比，高剂量组小鼠肝组织中GSH-Px活性和SOD活性显著高于模型组（P
3讨论
SOD能催化O-2.转变为H2O2和O2的歧化反应：2O-2.＋2H+H2O2+O2，在SOD活性降低时O-2.经Haber-Weiss反应生成对机体毒性更强的OH自由基，SOD清除O-2.，可有效地降低OH的含量。葡萄籽提取物灌胃30 d后，中、低剂量组小鼠红细胞提取液SOD活性上升，而辐照后高剂量组肝脏中SOD活性上升。葡萄籽提取物能不同程度的拮抗模型组中GSH-Px的下降。这与Rong [5]的报道一致。MDA是LPO（脂质过氧化物）的主要降解产物，其含量可反映脂质过氧化的程度，各剂量组MDA水平均降低，说明对肝脂质过氧化有明显的拮抗作用。
本实验表明，葡萄籽提取物能升高小鼠血中SOD和GSH-Px活性，具有明显的抗脂质过氧化作用；能明显拮抗因氧化损伤造成的肝组织中GSH-Px和SOD活性下降及MDA升高。表明葡萄籽提取物具有较好的抗氧化功能。
参考文献
[1]张桥. 卫生毒理学基础 [M]. 第3版. 北京：人民卫生出版社，2000：58-62.
[2]王建平. 葡萄籽提取物的神奇功效［J］. 食品与药品，2005，7（2）：59-61.
[3]Passwater R A, Kandaswami C. The benefits of pycnogenol [C]//. Pycnogenol-The Super‘protector’Nutrient. New Canaan, CT: Keats Publishing, 1994: 7 -10.
[4]凌智群，谢笔钧. 莲房原花青素抗氧化损伤作用的研究［J］. 食品科学，2002，23（7）：98-100.
[5]Rong Y. Pycnogenol protects vascular endothelial cells from t-butyl hydroperoxide induced oxidant injury[J]. Biotechnol Ther, 1994-1995, 5(3-4): 117-126.
注：“本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。”