HPLC法测定消疬合剂(Ⅱ)中芍药苷含量

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摘要：目的：测定消疬合剂（Ⅱ）中芍药苷的含量。方法：用高效液相色谱法（hplc），Hanbon Lichrospher C18色谱柱，流动相为乙腈-0.1%磷酸（13∶87）；检测波长230nm，流速1.0ml/min，柱温为室温，灵敏度0.02AUFS。结果：芍药苷线性范围为1.6ug～8.0ug （r=0.9994），平均回收率98.28%，RSD为1.32%（n=5）. 结论： 本文方法简便可靠，专属性强，准确度高，重现性好，可有效控制制剂的质量。

关键词：消疬合剂（Ⅱ）；白芍；芍药苷；高效液相色谱法；HPLC；含量测定

消疬合剂（Ⅱ）是常州市第三人民医院根据临床中医验方自制的制剂。该方由白芍、夏枯草、当归、地龙等18味中药组成，临床上有清热化痰，软坚散结的功效，适用于瘰疬、痰核、未溃、已溃各期。白芍为方中主药，芍药苷为其主要有效成分，选其作为测定指标。

1.仪器、材料与试剂

Waters-600E高效液相色谱仪，Waters-2487双通道紫外检测器（美国Waters公司）；JS -3030色谱工作站（大连江申分离科学技术有限公司）；超声清洗机（无锡超声电子设备厂）；芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所 批号0736-200118）；消疬合剂（Ⅱ）由常州市第三人民医院制剂室提供（批号110117 、110413 、110615、111025、111130）；处方药材由镇江药材公司提供，经鉴定为正品。多效蒸馏水由本院制剂室提供。乙腈为色谱级，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。

2.方法与结果

2.1色谱条件[1]

色谱柱：Hanbon Lichrospher C18 （4.6mm×150mm）。 流动相：乙腈∶0.1%磷酸（13∶87）；流速1.0ml/min，检测波长：230nm，柱温：室温。理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000。如图1.

图1. 对照品溶液（A）和供试品溶液（B）的HPLC图谱 S. 芍药苷

2.2 对照品溶液的制备

精密称取干燥至恒重的芍药苷对照品8mg，置10ml容量瓶中，，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备[2]

精密量取消疬合剂（Ⅱ）5ml，边振摇边加入无水乙醇约30ml ，超声处理10min，滤过，残渣用50%乙醇10ml洗涤2次，合并滤液和洗液，水浴蒸干，残渣加水10ml使溶解，再用水饱和正丁醇提取3次，每次15ml，合并正丁醇溶液，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10ml，用微孔滤膜（孔径0.45um）过滤，滤液作为供试品溶液。

2.4标准曲线的绘制

分别精密吸取对照品溶液2ul，4ul，6 ul，8 ul，10 ul进样，测定峰面积。以峰面积为纵坐标（Y），进样量（ug）为横坐标（X），进行线性回归，得回归方程：Y=1591.63X+504.91（r=0.9994，n=5），线性范围：1.6ug～8ug。

2.5精密度试验

精密量取对照品溶液10ul，按上述色谱条件测定，连续进样5次，测得芍药苷对照品峰面积值，计算RSD为1.53%。

2.6 加样回收率试验

精密量取已知含量的样品1ml，分别加入芍药苷对照品适量，按样品测定法进行测定。结果见表1.

表1 加样回收率试验结果（n=5）

2.7样品中芍药苷的含量测定

取2.3项供试品溶液10ul进样，在上述色谱条件下测定峰面积，计算样品含量，结果见表2.

表2 样品中芍药苷含量（n=5）

3.小结.

本制剂为糖浆剂，且有多味动物药，其成品中含有大量的糖分和蛋白质，为避免其对芍药苷含量测定产生影响，故先用醇沉法将样品中大量糖份和蛋白质沉淀分离除去。消疬合剂（Ⅱ）为纯中药制剂，成分较复杂。以白芍中芍药苷的含量测定来控制质量标准，方法简便、快捷、准确、重现性好，可有效控制消疬合剂（Ⅱ）的质量[3]。

参考文献：

[1] 狄留庆，张丽云，沈金文等. HPLC测定血压平滴鼻剂中芍药苷的含量[J].中国中药杂志，1999.24（1）：35～36.

[2] 孙冬梅，陈路林. 健胃舒颗粒质量标准的研究[J].中成药，2002.24（10）：752～755.

[3] 宗颖，王玉，张辉. 高效液相色谱法测定胰胆宁胶囊中芍药苷含量[J]. 吉林中医药，2006. 26（8）：64-65.