露温、露时对黄瓜霜霉病菌侵染的影响
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摘要：在人工控温、控湿条件下，研究露温、露时对黄瓜霜霉病孢子囊侵染的影响。结果表明：黄瓜霜霉病孢子囊在5～30 ℃的条件下均能完成侵染；在5 ℃、10 ℃、15 ℃、20 ℃、25 ℃和30 ℃ 6个温度下完成侵染所需的最短露时分别为 5 h、3 h、2 h、1 h、2 h和3 h；其侵染的最适温度在20 ℃左右。
关键词：黄瓜霜霉病；露温；露时；侵染
黄瓜霜霉病是一种在黄瓜上普遍发生且为害严重的真菌性病害，该病害为气传病害，潜育期短，再侵染频繁，易于流行，我国各地均有发生，露地和保护地栽培的黄瓜常因此病害的为害而遭受巨大损失。黄瓜霜霉病菌是一种专性寄生菌，只侵染葫芦科植物，主要为害叶片，发病后传播速度快，对黄瓜生产威胁极大[1]。
黄瓜霜霉病的发生受温、湿度条件影响很大，随着设施栽培的发展，设施内的温、湿度条件有利于该病害的发生，使霜霉病成为黄瓜生产上的主要病害，研究并确定其侵染因子是防治该病害的重要环节[2-3]。Cohen Y[4]研究认为，露温、露时（即结露状态下的温度、时间）与霜霉病的发病时间存在相关性，本试验在人工控温、控湿条件下，研究露温、露时对黄瓜霜霉病菌侵染的影响，为实际生产中该病害的防治提供依据。
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试品种
供试黄瓜品种为津优35号。
1.1.2 供试菌种
接种前1 d，在试验田露地种植的黄瓜上采集新鲜的黄瓜霜霉病典型病叶，喷水后密封于自封保湿塑料袋中，置于15 ℃的恒温光照培养箱中保湿约12 h后，叶片背面产生浓密的灰黑色霉层，即为病菌的孢子囊和孢囊梗。
1.1.3 试验仪器与工具
恒温光照培养箱、显微镜、血球计数板、毛刷、小喷壶、自封保湿塑料袋和托盘等。
1.1.4 供试植株的准备
选择匀实饱满的黄瓜种子，放入30 ℃的恒温箱中催芽12 h左右，播种于装有草炭土的塑料花盆中，1个花盆播2粒。注意要选用相同的培养基质，同时播种，并采用相同的栽培管理方式。在温室内张挂黄板诱杀蓟马，防止蓟马取食黄瓜叶片。
当黄瓜苗长出2～3片真叶时，选择长势良好、无病虫害且尽量整齐一致的黄瓜苗备用。在接种前1 d晚上，将用于试验的黄瓜苗分别放置于7个处理温度下的恒温光照培养箱内，进行温度预处理，每个培养箱内放11盆黄瓜苗。
1.2 试验方法
1.2.1 试验时间及地点
试验于2011年9月至10月进行，试验田位于临沂市河东区太平街道郭太平村。
1.2.2 试验设计
试验设7个露温：5 ℃、10 ℃、15 ℃、20 ℃、25 ℃、30 ℃和35 ℃，每个露温设11个露时：1 h、2 h、3 h、4 h、5 h、6 h、7 h、8 h、10 h、12 h和24 h，共77个处理，每个处理至少2株黄瓜苗，每株苗至少2片真叶。露温由7台恒温光照培养箱控制，每台培养箱设为1个温度处理；露时为黄瓜苗从接种后至去掉保湿塑料袋的时间。重复3次。
1.2.3 试验步骤
1.2.3.1 配制霜霉病菌悬浮液 从恒温箱内取出病叶，用毛刷将病斑上新产生的孢子囊轻轻刷到盛有纯净水的烧杯中，配制成浓度为1×104个/mL的孢子囊悬浮液，可加入1～2滴吐温，然后倒入小喷壶中待用。孢子囊悬浮液现用现配。
1.2.3.2 接种及露温、露时处理 从恒温箱内取出供试黄瓜苗，将配好的孢子囊悬浮液喷于叶片背面，接种后迅速套上自封保湿塑料袋保湿，置于相应温度处理的培养箱内培养，使孢子囊在相应温度下侵染。到达处理时间后，取出黄瓜苗，去掉自封保湿塑料袋，贴上相应的露温及露时标签，再放回到相应恒温箱的通风口处使其风干。第2天傍晚，将接种后的黄瓜苗移栽至田间让其自然发病，注意要加罩防虫网，防止蓟马等害虫为害。
1.2.3.3 记录病斑数 接种黄瓜苗发病后，等到病斑数量不再增加时，检查接种叶片的病斑数量并记录数据。取3次重复的平均值，计算出每个病叶上的平均病斑数，并做出表格，观察露温、露时对黄瓜霜霉病孢子囊侵染的影响。
2 结果与分析
2.1 不同露温、露时处理下叶片的平均病斑数
由表1可知，在相同露时、不同露温下，黄瓜单叶发病情况的差异比较明显。随着温度的升高，单叶病斑数逐渐增多，到15 ℃和20 ℃时发病基本上达到顶峰；之后随着温度的升高，单叶病斑数逐渐减少，到35 ℃时不再发病。说明低温和高温处理对黄瓜霜霉病孢子囊的侵染均有抑制作用。
在相同露温、不同露时下，黄瓜单叶发病情况也呈现出一定的规律。随着露时的延长，单叶病斑数有增加的趋势；当露时延长到一定阶段时，单叶病斑数趋于平衡或下降。下降的主要原因是病叶干枯，无法准确纪录病斑数。
2.2 不同温度下黄瓜霜霉病孢子囊侵染发病所需最短露时
由表1还可知，在不同温度下，黄瓜霜霉病孢子囊侵染发病（单叶平均病斑数达到1个以上）所需的最短露时是不同的。在5 ℃条件下，需要露时5 h才能引起侵染发病，时间最长；在20 ℃条件下，露时1 h就可引起侵染发病；在15 ℃和25 ℃条件下，露时2 h可引起侵染发病；而在10 ℃和30 ℃条件下，侵染发病所需的最短露时是3 h；在35 ℃条件下，即使露时达到24 h也未引起侵染发病，如图1所示。
3 结论与建议
试验结果证明，露温、露时对黄瓜霜霉病孢子囊的侵染量有直接影响，在不同温度处理下，黄瓜霜霉病孢子囊侵染量随露时而变。黄瓜霜霉病孢子囊在5～30 ℃的环境条件下能完成侵染，最适温度为20 ℃左右；在5 ℃、10 ℃、15 ℃、20 ℃、25 ℃和30 ℃ 6个温度下完成侵染所需要的最短露时分别为5 h、3 h、2 h、1 h、2 h和3 h。
根据试验结论，建议在实际生产中利用黄瓜生长与黄瓜霜霉病菌侵染对环境条件要求的不同，通过闷棚、通风排湿等措施进行温、湿度双控制，创造有利于黄瓜生长发育同时能抑制病原菌侵染的环境条件，从而减轻黄瓜霜霉病菌对保护地黄瓜生产的为害。
参考文献
[1] 石延霞.黄瓜霜霉病菌侵染模拟、致病机理和高温诱导抗病性的研究[D].哈尔滨:东北农业大学,2002.
[2] Ding KJ,Tan GJ,Ji BH,et al.Factorial analysis of prevalence and damage of rice sheath blight[J].Chinese Journal of Applied Ecology,1998,9(1):47-50(in Chinese).
[3] Li Y,Cheng HY,Fang SM,et al.Ecological factors affecting prevalence of kiwifruit bacterial canker bacteriostatic action of bacteriocides on Pseudomonas syringae pv.actinidae[J].Chinese Journal of Applied Ecology,2001,12(3):359-362(in Chinese).
[4] Cohen Y.The combined effects of temperature,leaf,wetness and inoculum concentration on infection of cucumbers with Pseudoperonospora cubensis[J].Canadian Journal of Botany,1977,55:1478-1487.