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皇后白掌的组培快繁试验研究

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摘 要:以皇后白掌的茎尖为外植体,在不同激素成分及浓度水平下进行组织培养。结果表明:适宜的诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2 mg/L,诱导率达100%;不定芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L,芽增殖系数达6.0;最佳生根培养基为1/2 MS+NAA0.5mg/L,生根率100%。

关键词:皇后白掌;组织培养;快速繁殖

白掌(spathiphyllum floribundum)又名白鹤芋,为天南星科苞叶芋属多年生常绿草本观叶植物。叶片翠绿,佛焰苞洁白无瑕,犹如白鹤翘首,亭亭玉立,故给人以“纯洁平静、祥和安泰”之美感。由于白掌花、叶兼美,轻盈多姿,生长旺盛,且又耐阴,具有净化空气的作用,是中小盆栽花卉和切花的重要品种,市场前景广阔[1]。皇后白掌(Spathiphyllum floribundum “Queen”)为天南星科白鹤芋属观赏植物的一种,植株中等大小,叶片宽可达20cm以上,叶长可达40cm以上,花大小可达10cm×20cm[2],通常以分株法繁殖,年繁殖系数低,利用组培的方法即可在短时间内扩繁大量组培苗供生产应用[3,4]。目前皇后白掌组培快速繁殖研究还未见有报道,本试验旨在为其工厂化育苗提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 植物材料。试验材料以广西钦州市林业科学研究所花卉产业化基地提供的生长健壮、叶色浓绿、花朵大、色泽亮的皇后白掌植株茎尖作为外植体[5]。

1.1.2 培养基。以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素(6-BA)、生长素(NAA、IBA),添加蔗糖3%,琼脂0.6%,pH值5.8。

1.2 培养方法

1.2.1 茎尖培养。将选好的皇后白掌完整植株去根系及叶片后,用自来水冲洗干净,切除暴露在外界的表层,在超净工作台上用75%酒精表面消毒处理30s,转入0.1%升汞溶液灭菌7~8min,用无菌水冲洗5~6次。切取3~5mm的茎尖,接种到MS+6-BA 2.0mg/L +NAA 0.2 mg/L培养基中诱导愈伤组织[6]。将诱导出的愈伤组织接种到相同培养基诱导丛生芽,15d转1次。培养温度25~30℃,光照时间10~12h/d,光照强度1500~2000Lx。

1.2.2 丛生芽增殖培养。当诱导出的丛生芽长到0.5~0.8cm时,将丛生芽连同愈伤组织分切成0.5cm的小块,分别置于含不同浓度NAA和6-BA的MS培养基中培养,30d后统计每小块增殖的植株数。每瓶接种3块,重复4次。

1.2.3 组培苗生根培养。当分化出的芽丛达3~4cm,且有4~5片叶时,将幼苗切成单株,接种到不同处理的培养基中诱导生根,此时采用自然光照为主,阴雨天采用日光灯辅助照射。经25d培养后观察生根情况。

1.2.4 移栽。生根培养2个月后,要及时洗苗移栽,选择叶色浓绿,生长健壮,根系发达的生根苗,用自来水洗净残留在根部的培养基后,即可移栽到用0.3%高锰酸钾溶液消毒过的混合基质中。

2 结果与分析

2.1 愈伤组织与不定芽的诱导

将皇后白掌茎尖接种到培养基MS+6-BA 2.0 mg/L +NAA 0.2mg/L中,10d后茎尖增粗、伸长、基部膨大,30d左右形成愈伤组织。此后经约50d的培养,茎基部便出现一些绿色小芽点。将其转移到相同的培养基中继续培养,丛生小芽点增殖并伴有愈伤组织发生,继续培养愈伤组织也可分化出丛生小植株。

2.2 不同激素浓度对丛生芽增殖的影响

从表1可以看出,不同浓度的6-BA和NAA对芽增殖的效果不同,方差分析结果表明:不同浓度的6-BA和NAA水平F=84.5**(F0.01(2,5)=13.3),说明不同浓度的6-BA和NAA对芽增殖影响呈极显著差异。由此筛选出了MS+6-BA 2.0mg/L +NAA 0.5mg/L的培养基为丛生芽增殖较佳配方,平均增殖数达6株,丛芽团块增殖快,再生植株叶片展开。较低浓度的6-BA(0.5mg/L)或较高浓度的6-BA(3.0mg/L)都不适合皇后白掌的增殖。

2.3 不同种类生长素对芽苗生根的影响

从表2可以看出,在4种培养基上小苗基部都有3~5条直径1mm左右、长1~2.5cm的根系产生,生根率85%~100%。其中IBA诱导的主根较少、根细长;NAA与IBA配合的培养基诱导的主根较多,主根与须根分明;在NAA诱导的培养基上以1/2MS+NAA 0.5mg/L的效果最佳,主根多且粗壮,须根多,苗长势较好。

2.4 移栽

当小植株长到约4cm高时,可进行移栽。移栽前先将幼苗炼苗5~7d(阳光过强时注意遮阴)。然后打开瓶盖将苗取出,洗去根部培养基,移栽到珍珠岩+泥炭土(1:4)的混合基质中,保持90%遮阳率和85%以上的湿度,30d后成活率达98%以上。

3 结论与讨论

本研究表明,皇后白掌茎尖组培诱导比较容易形成愈伤组织并分化出芽,芽苗增殖生长旺盛,接种后幼苗很快长满整瓶,增殖苗高度在3~4cm时可获得壮苗。茎尖初代培养基以MS+6-BA 2.0 mg/L +NAA 0.2 mg/L为宜;在增殖阶段,以MS+6-BA 2.0mg/L +NAA 0.5 mg/L为宜,通过以芽繁芽的方式,丛生芽均能大量增殖,且40d就可以进行继代增殖,增殖数量达6.0;1/2MS+NAA0.5mg/L可促进芽苗生根,根系粗壮;移栽基质为珍珠岩+泥炭土(1:4)的混合基质,移栽成活率达98%以上。(收稿:2012-03-27)

参考文献:

[1] 林加根,鞠一栋,吴维坚,等.娇小白掌的组培快繁研究[J].现代农业科技,2010,13:218-221.

[2] /wiki/%E7%99%BD%E9%B9%A4%E8%8A%8B%E5%B1%9E,2011-4-18.

[3] 覃和业,邱美欢.白掌的组织培养和快速繁殖[J].热带农业科学,2008,28(1):32-33.

[4] 倪静波,曾宋君.白掌的繁殖方法[J].花卉,2006(7):25.

[5] 吴丽君.神灯白掌组织培养的研究[J].福建林学院学报,2000,21(2):169-172.

[6] 李明俊.植物组织培养教程[M].北京:中国农业大学出版社,2002.