MP DNA检测对小儿支原体肺炎的诊断价值

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[摘要] 目的 探讨肺炎支原体(mp) dna检测在小儿支原体肺炎早期诊断中的价值。方法 用荧光定量聚合酶链反应(FQ- PCR)技术对我院2009年1～11月805例疑似MP感染患儿的咽拭子标本进行MP DNA检测,同时采取静脉血检测805例患儿血清中MP-IgM抗体。结果 805倒患儿咽拭子标本MP DNA检测阳性率显著高于血清中MP-IgM抗体检测阳性(P

[关键词] 肺炎支原体; 荧光定量聚合酶链反应; 支原体肺炎

[中图分类号] R725.512 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2010)07-70-02

肺炎支原体(MP)是引起呼吸道感染的常见病原微生物,是一类介于细菌与病毒之间、能独立生存的微生物[1]。近年来支原体感染日渐增高,有局部流行的趋势,仅凭临床表现很难与病毒性和细菌性下呼吸道感染相鉴别,从而延误治疗,并导致肺外并发症的发生。因此,及时而准确的病原学诊断有助于临床明确诊断和治疗[2]。因此笔者从2009年1～11月用荧光定量聚合酶链反应技术对我院805例疑为呼吸系统MP感染的患儿咽拭子标本进行MP DNA检测,同时采取静脉血检测患儿血清中MP-IgM抗体,以探讨患儿咽拭子标本MP DNA检测在MP感染早期诊断的价值,并报道如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象

病例全部来自我院门诊和住院疑似MP感染患儿,年龄分布:5岁124例。所有患儿均有发热和咳嗽症状。

1.2 标本采集

患儿发病后采集静脉检测患儿血清中MP-IgM抗体,所有病例就诊24h内用咽拭子取患儿咽分泌物为标本检测MP-DNA。

1.3 检测方法

血清MP-IgM抗体检测采用金标免疫斑点法法,MP DNA检测采用荧光定量聚合酶链反应技术,MP DNA大于103copies/mL为阳性。

1.4 仪器与试剂

MP DNA定量使用杭州博日Line-Gene实时荧光定量PCR仪,试剂由上海申友生物有限公司提供。MP-IgM抗体试剂由深圳博卡生物技术有限公司提供

1.5 统计学处理

对805例患儿咽拭子标本MP DNA检测阳性率与血清中MP-IgM抗体检测阳性率进行比较。采用χ2检验。

2 结果

2009年1～11月805例疑为呼吸系统MP感染的患儿咽拭子标本进行MP DNA检测阳性315例,阳性率39.13%。血清MP-IgM阳性167例,阳性率20.75%。两种检测方法比较咽拭子标本MP DNA检测阳性率显著高于血清MP-IgM抗体检测阳性率,差异有统计学意义(P

3 讨论

近年来,MP感染率呈增高趋势,根据临床症状很难鉴别由肺炎支原体或病毒、细菌等引起的呼吸道感染,给临床诊治带来一定的难度。近年发病增多并有局部流行的趋势,故早期诊断极为重要。

肺炎支原体实验室培养难度较大,耗时较长,且阳性率较低,通常需2~3周,延误了患者的最佳治疗时机,不适宜临床检查。目前临床上用于MP感染诊断的方法主要有血清学MP特异抗体检测和PCR方法。MP感染临床症状出现后7～10d是IgM抗体检测的最佳时机(窗口期),患儿发病初期(窗口期内)血清MP-IgM检测往往为阴性,容易漏诊和误诊,这也是血清中MP-IgM抗体检测阳性率低于咽拭子标本进行MP DNA检测阳性率的原因[4]。本文对临床可疑MP感染者用MP DNA检测和MP-IgM抗体检测两种方法作对比性分析,咽拭子标本进行MP DNA检测阳性率显著高于血清中MP-IgM抗体检测阳性率(P

以标记特异性荧光探针为特点的实时荧光定量PCR作为分子生物学的实验手段,完全闭管扩增和检测,同时采用了dUTPUNG系统,有效地防范了PCR扩增物的污染,避免假阳性结果。聚合酶链反应(PCR)技术用于病原体的检测,以其快速、简便、灵敏等优点是以往其他检测技术无法比拟的。

[参考文献]

[1] 钟天鹰,毛志红,张其华. 荧光定量PCR法检测呼吸系统感染儿童肺炎支原体DNA的分析[J]. 临床儿科杂志,2002,20(3):137-139.

[2] 吴瑞萍,胡亚美,江载芳. 支原体肺炎//实用儿科学[M]. 第6版. 北京:人民卫生出版社,1996:1171-1172.

[3] 袁壮,董宗祈,鲁继荣,等. 小儿肺炎支原体肺炎诊断治疗中的几个问题[J]. 中国实用儿科杂志,2002,17(8):449-457.

[4] 林国跃,杨震,张和平. 呼吸道感染患者肺炎支原体IgM抗体检测情况[J]. 预防医学,2004,22(1):44-45.

(收稿日期:2009-12-21)