高效液相色谱法测定贝诺酯分散片的含量

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【摘要】目的 建立HPLC法测定贝诺酯分散片的含量。方法 采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18（ 150mm×4.6mm，5μm）色谱柱；流动相：甲醇-水（50：50）；检测波长240nm；流速1mL・min-1；柱温35℃。结果 贝诺酯对照品在10～110μg・mL-1范围内线性关系良好，回归方程为Y=246638×102X+169524r=0.9998 （n=6），平均回收率为99.6%（RSD=1.0%）。结论 该法方便、快速、准确，可用于贝诺酯分散片的质量控制。

【关键词】贝诺酯分散片 贝诺酯 高效液相色谱法

中图分类号：R927.2文献标识码：B文章编号：1005-0515（2011）10-035-02

Content Determination of Benorilate Dispersible Tablets by HPLC

Li Tao Zhang Tao

（Anyang Institute for Food and Drug Control, Anyang, 455000）

【Abstract】Objective To establish a method for the determination of Benorilate Dispersible Tablets.Method The separation was achieved by using a reversed phase chromatographic column (Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18, 150mm×4.6mm, 5μm) composed of methanol-water (50:50) at a wavelength of 240 nm. The column temperature was set at 35℃ and mobile phase flow rate was 1.0mL・min-1. Results Benorilate showed a good linearity in the range of 10～110μg・ml-1,and the regression equation was Y=246638×102X+169524r=0.9998 （n=6）,the average recovery was 99.6%（RSD=1.0%）. Conclusion The method is simple, rapid, accurate and with good reproducibility .It can be used for the quality control of Benorilate Dispersible Tablets.

【Key Words】Benorilate Dispersible Tablets Benorilate HPLC

贝诺酯为阿司匹林与对乙酰氨基酚以酯键结合的中性化合物[1，2]，有解热镇痛作用，用于感冒或流感引起的发热，也用于缓解轻至中度疼痛，不良毒副反应较低。贝诺酯分散片质量标准收载在国家药品标准《新药转正标准》第70册[3]，鉴别是薄层色谱法，含量测定用紫外-可见分光光度法。笔者查阅资料[4，5]建立了用高效液相色谱法鉴别并测定贝诺酯分散片中贝诺酯的含量。此方法专属性强，快速、准确，可作为鉴别和含量测定用。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Waters高效液相色谱仪，Alliance系统（包括2695低压四元泵，自动进样器，柱温箱，2996DAD二极管阵列检测器，Empower色谱工作站）；SECOMAM UVIKON XL紫外-可见分光光度仪。

1.2 试药

贝诺酯对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号100225-200502）；贝诺酯分散片（规格0.5g）3批（市售）；甲醇为色谱纯；无水乙醇为分析纯；试验用水为重蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件和系统适用性试验色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18（ 150mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇-水（50：50）；检测波长：240nm；流速：1mL・min-1；柱温：35℃；进样量：10μL。理论板数按贝诺酯对照品峰计不低于7000。

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品溶液制备 精密称取贝诺酯对照品50mg，置100mL量瓶中，加无水乙醇约70 mL，超声10min使其溶解，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，得对照品储备液；精密量取对照品储备液5mL，置50mL量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2.2 供试品溶液制备 取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于贝诺酯100mg），置100mL量瓶中，加无水乙醇约70 mL，超声10min使其溶解，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置100mL量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3 方法学考察

2.3.1 线性 精密量取贝诺酯对照品储备液1，3， 5，7，9，11 mL分别置50mL量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，分别进样10μL，测定峰面积值。以峰面积（Y）对进样量（X）进行线性回归处理，回归方程为Y=246638×102X+169524r=0.9998，线性关系范围为10～110μg・mL-1。

2.3.2 峰纯度检查和检测波长的确定 取上述对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，以DAD检测器在200～400nm波长处记录色谱图，高效液相三维谱图显示贝诺酯在240nm的波长处有最大吸收，见图1。故选择240nm为检测波长，检测灵敏度较高。作峰纯度角检查，其色谱图中的主峰为一纯物质峰，见图1。

图1 贝诺酯紫外光谱图

图2 HPLC色谱图 (A.空白; B.对照品溶液; C.供试品溶液)

2.3.3 回收率试验精密称取已测定含量的样品，置100mL量瓶中，分别精密加入一定量的贝诺酯对照品，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取滤液按上述色谱条件测定，回收率结果见表1。

表1回收率试验结果

2.3.4精密度试验 取对照品溶液，进样10μL，重复进样６次，按上述色谱条件测定峰面积，贝诺酯的RSD为1.1%。

2.3.5 重复性试验 取同一供试品溶液，按含量测定项下方法操作，测定6份，进样１0μL，贝诺酯的RSD为1.4%。

2.3.6 稳定性试验 取供试品溶液，分别在0，2，4，10，12，24h进样10μL，测定峰面积，RSD为1.8%，结果表明供试品在24h内基本稳定。

2.3.7 样品测定 按2.1项下的色谱条件试验，分别取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，见图2，按外标法以峰面积计算，结果见表2。

表2样品含量测定结果（%，n=3）

3 讨论

3.1流动相选择 借阅有关资料[6，7]对流动相进行了试验，当甲醇-水系统pH值在4.5以下和4.5以上时，主峰峰形差别不大[8，9]，满足分析要求，所以选择甲醇-水系统。

3.2 色谱条件 本文采用高效液相色谱法用C18柱对贝诺酯分散片进行含量测定，同时还可提高鉴别的专属性，方法快速、简便、准确，可用于贝诺酯分散片的质量控制。

参考文献

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