家兔玻璃体液铁\磷含量变化与PMI的相关性研究

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[摘要] 目的 研究死后家兔玻璃体液铁、磷浓度变化与死亡时间的关系,寻找一种精确推断PMI的方法。方法 应用全自动生化分析仪检测样本中铁、磷含量,对所得数据进行统计学处理。结果 家兔死后54h内眼玻璃体铁、磷元素与PMI显著相关,其单元回归方程分别为y=14.48-0.244x(x=PMI,y=Fe,r=-0.993)、y=-4.573+0.366x(x=PMI,y=Fe,r=0.965)、y=0.137+0.041x(x=PMI,y=P,r=0.975)。结论 在54h内玻璃体液铁、磷含量变化可作为推断pmi的参考指标。

[关键词] 法医病理学; 死后经过时间; 玻璃体液; 离子浓度; 家兔; 全自动生化分析仪

[中图分类号] R919.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2010)03-07-02

Correlation between Postmortem Interval and Levels of Iron and Phosphorus in Rabbit Vitreous Humor:An Experimental Study

LI Hai GAO Cairong

College of Forensic Medicine of Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China

[Abstract] ObjectiveTo investigate the correlation between postmortem interval(PMI)and the concentration of iron(Fe)and phosphorus(P)in vitreous humor in rabbits after death in an effort to seek a exact method of estimating PMI. MethodsThe levels of iron(Fe)and phosphorus(P)in the vitreous humor were measured by automatic biochemistry analyzer. ResultsThe iron(Fe)and phosphorus(P)levels in rabbit vitreous humor within 54h after death were related to PMI significantly. The formulate of the relationship between PMI and iron(Fe)level was y=14.48-0.244x(x=PMI,y=Fe,r=-0.993)and y=-4.573+0.366x(x=PMI,y=Fe,r=0.965)and the formulate of the relationship between PMI and phosphorus(P)level was y=0.137+0.041x(x=PMI,y=P,r=0.975). ConclusionThe levels of iron(Fe)and phosphorus(P)in rabbit vitreous humor within 54h may serve as a reference index for the estimation of PMI.

[Key words]Forensic pathology; Postmortem interval; Vitreous humor; Concertration of ionic; Rabbit; Automatic biochemistry analyzer

死亡时间推定(esti mati on of the time sincedeath)是法医学尸体检验首先要解决的问题。本实验旨在探索一种简单、快速、稳定,益于普及和推广的方法,以德国Cobas Integra 400全自动生化分析仪为工具,利用比色法研究家兔玻璃体液内铁和磷含量变化,以找出其与死后时间(post mortem interval,PMI)的相关性,为进一步阐明死后经过时间的生物学效应提供实验性依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物分组及取材

健康家兔150只(雌雄不限,重约1～2.5kg),随机分为10组,每组15只,在室内将兔断头处死后,于死后即时、6、12、18、24、 30、36、42、48、54h各取玻璃体液1mL,以3000r/min离心(4℃)2min,取0.5mL上清待测。

1.2 检测方法

将待测上清液加入德国Cobas Integra 400全自动生化分析仪测定通道。

1.3 统计学分析

所得数据采用SPSS10.0统计软件包进行单元回归分析,经t检验或方差分析,P

2 结果

家兔在死后即刻至死后54h间的Fe和P含量测定结果见表1。

由表1可知,家兔死后在6～30h之间,玻璃体液铁含量呈逐步下降的趋势,经Pearson相关分析,其与PMI呈明显的负相关,相关系数:-0.993(P

由表1可知,家兔死后在0～54h之间,玻璃体液磷含量呈逐步上升的趋势,经Pearson相关分析,其与PMI呈明显的正相关,相关系数:0.975(P

3 讨论

死亡时间推定一直是法医学的重点,它为公安侦察工作提供了有力的线索,受到国内外学者的广泛关注和研究[1,2]。玻璃体具有解剖位置相对隔离,很少受到污染和腐败的影响,发生化学变化比血液和脑脊液慢,其各种成分的变化相对稳定[3],是尸体化学研究的理想检材。玻璃体成分的死后变化与PMI关系也成为国内外法医学研究的热点[4,5]。本实验用CabasIntegra全自动生化分析仪研究不同的温度下家兔玻璃体液中Fe、P含量变化,探求其与PMI的相关性,取得了具有显著意义的结果,并获得了各自的回归方程,所得单元回归方程经t检验有显著意义(P

实验所用Cobas Intergra Phosphate和Cobas Intergra Iron试剂盒是一种体外诊断试剂盒,可以在CabasIntegra系统上分别对体液中的Fe和P浓度进行定量检测。其中体液铁在酸性介质中解离出来,被还原剂还原成二价铁,后者与亚铁嗪生成紫红色化合物,在562nm处监测其吸光度变化。体液中的无机磷在酸性溶液中与钼酸铵反应生成的磷钼酸铵复合物,直接在340nm波长处测定其吸光度。德国奥巴斯全自动生化分析仪可同时测定36个项目,其通过光电比色原理检测反应产物颜色深浅,被检物含量越高,反应产物颜色越深,检测数据越大。这两种方法的优点是简单、快速、稳定,有利于方法的普及和推广,同时其本底干扰可以通过设立空白对照来解决。

家兔死后玻璃液磷含量升高可能与死后细胞膜通透性增加有关,磷元素释放进玻璃体液有关,本试验与陶涛的研究[6]相一致。同时与文献[7]报道的猪尸体眼玻璃体液中磷含量的变化趋势基本相同。本实验铁元素的变化规律与许小明、龚志强的研究[8]相同,但铁元素在30h左右才从最低限开始上升,其原因不十分明确,有可能系实验系统误差所致,但不管怎样,有理由相信,随着设备自动化及先进化发展,应用玻璃体内磷、铁的含量变化来推测PMI将会成为推测死亡时间的有用方法。

由于本实验研究采用的是健康家兔,并统一了试验条件。这样,与人尸体就会有较大差异,人尸体所处的环境条件、个体差异等等均是死亡时间推断的影响因素。因此,对本文的研究成果是否有实用价值的评价有待于进一步作人尸体研究。

[参考文献]

[1] Al Alousi LM,Anderson RA,Worster DM,et al. Fact orsinfluencing the precision of estimating the postmortem interval using the triple-expon- ential formulae(TEF). A study of the effect of body variables and covering of the torso on the postmortem brain,liver and rectal cooling rates in 117 forensic cares[J]. Forensic Sci Int,2002,125(2-3):232-230.

[2] Nelson EL. Estimation of short-term postmortem intervalutilizing core body temperature:a new algorithm[J]. ForensicSciInt,2000,109(1):31-38.

[3] 祝家镇. 法医病理学[M]. 第2版. 北京:人民卫生出版社,2001:55-73.

[4] 龚志强,许小明,曾宪斌,等. 家兔死后眼玻璃体液锌镍含量与PMI关系的研究[J]. 法医学杂志,2001,17(3):129-131.

[5] Coe Ji. Vitreous potassium as a measure of the postmortem interval:a historical review and critical evaluation[J]. Forensic Sci Int,1989,42(2):201-213.

[6] 陶涛,胥劲,罗通行,等. 人体死后不同时间玻璃体液化学成分的变化趋势[J]. 四川大学学报,2006,37(6):898-900.

[7] Drolet R,D’Allaire S,Chagnon M. The evaluation of postmortem ocular fluid analysis as a diagnostic aid in sows[J]. J Vet Diagn Invest,1990,2(1):9-13.

[8] 许小明,龚志强,孙跃刚,等. 家兔死后眼玻璃体液镁、铁含量与PMI关系的研究[J]. 法医学杂志,2002,18(2):100-101.

(收稿日期:2009-10-21)