高效液相色谱法测定五柏参洗液中盐酸小檗碱的含量

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[摘要] 目的：建立HPLC法测定五柏参洗液中盐酸小檗碱含量的方法。方法：色谱柱为DiamonsilTM(钻石) C18(200 mm×4.6 mm，5 μm)，以乙腈-0.033 mol/L磷酸二氢钾溶液(40∶60) 为流动相，检测波长为345 nm，流速为1.0 ml/min。结果：盐酸小檗碱在10.87~108.70 μg/ml浓度范围内线性关系良好。平均回收率为99.67%，RSD=0.12%。结论：本法简便、灵敏，结果准确可靠，可用于五柏参洗液中盐酸小檗碱的含量测定。

[关键词] 五柏参洗液；盐酸小檗碱；高效液相色谱法

[中图分类号]R917 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）04（c）-019-02

Content determination of berberine hydrochloride in Wubaishen Cleaning Solution by HPLC

TONG Shao-hui1, LI Na2, CAI Yu-hua3

(1.Dandong Institute for Drug Control, Dandong 118002, China; 2.Dandong Traditional Chinese Medicine Hospital, Dandong 118000, China; 3. Dandong Yichuang Parmaceutical Company Limited, Dandong 118002, China)

[Abstract] Objective: To develop an HPLC method for the content determination of berberine hydrochloride in Wubaishen Cleaning Solution.Methods: The DiamonsilTM C18 column (200 mm×4.6 mm，5 μm) was used,and the mobile phase was acetonitrile-0.033 mol/L potassium dihydrogen phosphate(40∶60),the detective wavelength was set at 345 nm,the flow rate was 1.0 ml/min.Results: The calibration curve showed a good linearity in the range of 10.87~108.70 μg/ml.The average recovery was 99.67% with RSD of 0.12%.Conclusion: The method is simple,rapid and accurate.It can be used to determine the content of berberine hydrochloride in Wubaishen Cleaning Solution.

[Key words] Wubaishen Cleaning Solution; Berberine hydrochloride; HPLC

五柏参洗液由黄柏、苦参、百部、五味子4味中药组成，具有清热除湿，止痒的功效。用于湿热下注型阴道炎所致带下量多，色黄如脓，味臭等症。为保证制剂的内在质量，用高效液相色谱法对方中主药黄柏进行了含量测定。该法简便、易行、快速、灵敏，结果准确可靠。

1 仪器与试药

LC-10ATVP高效液相色谱，工作站Anastar（日本岛津）；盐酸小檗碱对照品（供含量测定用）购于中国药品生物制品检定所；五柏参洗液由丹东医创药业有限公司生产；乙腈为色谱纯；水为重蒸水，其他试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1 色谱条件[1]

色谱柱：DiamonsilTM(钻石) C18(200 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：乙腈-0.033 mol/L磷酸二氢钾溶液(40∶60)；检测波长：345 nm；流速：1.0 ml/min。

2.2 对照品贮备液与对照品溶液的制备

取在105℃干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品10 mg，精密称定，置100 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密量取2 ml，置5 ml量瓶中，摇匀，作为对照品溶液。

2.3 线性关系考察

精密量取对照品贮备液1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 ml分别置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，照上述色谱条件各进样10 μl，记录色谱峰图。以峰面积A为纵坐标，以浓度C (μg/ml)为横坐标，得回归方程为： A=1.337×104+2.899×106C (n=6)，r=0.999 98。结果表明，盐酸小檗碱在10.87~108.70 μg/ml浓度范围内线性关系良好。

2.4 精密度试验

精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液10 μl，重复进样6次，峰面积积分值的RSD为0.8%（n=6）。

2.5 回收率试验

分别精密量取已知含量的批号为20070510的样品2 ml，共9份，每3份分别加入盐酸小檗碱对照品贮备液10，20，30 ml，按样品测定项测定含量，计算回收率，结果见表1。

2.6 样品测定

精密量取本品5 ml，置50 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10 μl，按上述色谱条件测定盐酸小檗碱的含量，结果见表2。

3 讨论

从实验结果可见，5批样品中个别批次含量差异较大，可能与药材质量及制剂的制备工艺有关。因此为保证制剂的稳定性，应在投料前严格控制黄柏药材的质量并制定制剂质量标准，含黄柏以盐酸小檗碱计应不少于0.35 mg/ml。

[参考文献]

[1]国家食品药品监督管理局.国家中成药标准汇编（外科妇科分册）[S]. 2002.467 .

（收稿日期：2008-01-14）