HPLC法测定消食养儿颗粒中芍药苷的含量

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【摘要】 目的 建立消食养儿颗粒中芍药苷的含量测定方法。方法 用高效液相色谱法测定，选用ODS-C18色谱柱（5 μm,4.6 mm×250 mm），流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（16:84），流速：1.0 ml/min，检测波长：230 nm。结果 芍药苷在0.2～1.0 μg范围内线性关系良好，r=0.999 8，平均回收率为99.47％(n=5)，RSD为1.06%。结论 该方法简便、灵敏、准确、重现性好，可作为消食养儿颗粒中芍药苷的含量测定方法。

【关键词】 hplc；消食养儿颗粒；芍药苷；含量测定

Determination of content Paeoniflorin in Xiaosiyanger granule by HPLC

WANG Jin-piao, LUO Jia-ling, GUO Wei-zhong.The Second Hospital Affiliated to Zhongshan University, Guangdong Guangzhou 510120, China

【Abstract】 Objective To develop a method for paeoniflorin in Xiaosiyanger. MethodsHPLC with ODS-C18(5 μm,4.6 mm×250 mm) column was used. The mobile phase of paeoniflorin was a mixture of Acetonitrile-0.1％H3PO4 (16:84), with the flow rate of 1.0 ml/min and detection wavelength at 230 nm. Results Paeoniflorin (0.2-1.0 μg) showed fine linear relationship (r=0.999 8), the average recovery was 99.47%(n=5), RSD=1.06%. ConclusionThe method is quick, simple and accurate and can be the method to determination of content Paeoniflorin in Xiaosiyanger granule.

【Key words】 HPLC;Xiaoshiyanger granule;Paeoniflrin;Content determination

消食养儿颗粒是以白芍、炙黄芪、大枣、麦芽等中药加工制成的复方中药制剂，具有温中补虚，和里缓急，开胃消食的功效。用以治疗小儿厌食症等儿科常见病症。本文采用HPLC

法测定本产品中主药之一白芍中芍药苷的含量，方法简单可靠，重现性好。

1 仪器与试药

HP1100高效液相色谱仪(安捷伦)；二极管阵列检测器（DAD）；TU1221型紫外可见分光光度计（北京通用仪器有限公司）。芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所提供）；水为二次重蒸水（自制）；乙腈为色谱纯；其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件及系统适应性

ODS-C18色谱柱（5 μm,4.6 mm×250 mm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（16∶84），流速：1.0 ml/min；柱温：35℃；检测波长：230 nm；理论板数按芍药苷峰计算不低于3000。

对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 ml含60 μg的溶液，摇匀，即得。供试品溶液的制备：取本品内容物，研细，取约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇25 ml，密塞，称定重量，超声处理（功率150 W，频率20 kHz）10 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

按处方比例及生产制备方法，制备不含白芍的阴性样品，再按供试品溶液的制备方法制备成阴性供试液。在前述色谱条件下，分别取供试品溶液、对照品溶液及阴性供试液各10 μl进样，结果见图1，对照品峰与阴性供试峰没有重叠。

2.2 芍药苷检测波长的确定

取芍药苷对照品溶液在波长200～400 nm的范围内作紫外光谱扫描，根据扫描结果，选择最大吸收波长230 nm作为检测波长。

2.3 线性关系考察

精密称取芍药苷对照品10 mg，置50 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取上述溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml分别置于10 ml的量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别进样10μl，测定峰面积。以芍药苷的进样量（μg）横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。其线性方程为：Y=1 413 687.5X＋10 258.3，r=0.999 8。结果表明，芍药苷进样量在0.2～1.0 μg的范围内与峰面积呈良好线性关系。

2.4 精密度试验

取2.1项下的对照品溶液，重复进样5次，测定芍药苷峰面积，并计算其相对标准偏差，结果RSD=0.87%。

2.5 稳定性试验

取2.1项下的对照品溶液，分别于室温下0、1、2、4、6、8 h后进样10 μl测定峰面积，RSD=0.72%。

2.6 重现性试验

对同一批样品重复取样6次，经处理后按前述色谱条件测定芍药苷的含量，结果RSD=1.06％。

2.7 回收率试验

精密称定5份已知含量的消食养儿颗粒，每份约1.0 g，置50 ml量瓶中，分别加入浓度为0.061 12 mg/ml的对照品溶液和甲醇各20 ml，按“供试品溶液的制备”方法操作，得加样溶液，分别吸取10 μl进样测定峰面积，结果见表1。

2.8 样品测定

精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10 μl，分别注入液相色谱仪。测定峰面积，计算即得。测定3批样品，每批样品各测3次，结果见表2。

3 讨论

3.1 因白芍的主要活性成分为芍药苷，故选用芍药苷为含量测定指标。供试液图谱中最高峰为芍药苷主峰，和阴性样品比较时需注意其位置的不同。

3.2 芍药苷可溶于甲醇，因此可用甲醇来提取样品，而其他成分较少溶解，因而采用甲醇提取方法无需复杂的预处理，简化实验的操作过程。

3.3 本方法准确、快速、简便、重现性好，可作为该产品中芍药苷的含量测定方法。

参 考 文 献

［1］ 李越峰,杨武亮,沈菲，等.高效液相色谱测定白芍中芍药苷的含量.时珍国医国药,2008,19(2):438-439.

［2］ 张玲.高效液相色谱法测定参梅养胃颗粒中芍药苷的含量. 药学与临床研究，2008,16(1):77-78.

［3］ 施炜,屈蓉,刘浏.高效液相色谱法测定胃舒宁颗粒剂中芍药苷的含量.中国实验方剂学杂志,2006,12(4):20-21.